| 研究課題/領域番号 |
09680049
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
家政学
|
|---|
| 研究機関 | 中村学園大学 |
|---|
研究代表者 |
原 孝之 中村学園大学, 家政学部, 助教授 (10164998)
|
|---|
| 研究分担者 |
古賀 信幸 中村学園大学, 家政学部, 助教授 (80136514)
柳瀬 敏彦 九州大学, 医学部・付属病院, 助手 (30239818)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1997 – 1999
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
1999年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1998年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1997年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
|
|---|
| キーワード | 高密度リポ蛋白質 / 動脈硬化予防 / レセプター / 食生活 / 高密度リボ蛋白質 |
|---|
| 研究概要 |
高密度リポ蛋白質(HDL)は、心筋梗塞や動脈硬化を防ぐ重要な蛋白質である。HDLの動脈硬化予防に果たす役割を解明するためには、コレステロールの逆輸送による最終運搬場所の肝臓細胞膜のHDL-レセプターの同定とその分子解明が必要であるが、未だその実体は不明のままである。本研究では、種々の動物の肝臓細胞膜分画より分子量120kDaと95kDaのHDL-レセプターの精製とcDNAクローニングをめざした。95kDaHDL-レセプターを精製し、N-末端アミノ酸配列を分析した結果、DDEVDVDGTVと読め、ラットGRP-94と一致した。SDS-PAGEで単一な分子量120kDaのHDL-レセプターを得ることに成功した。N-末端のアミノ酸が検出されないことから、N-末端がブロックされていることが考えられた。今後、HDL-レセプターの内部のアミノ酸配列をペプチド分離精製後、検討する必要がある。HDL-レセプターのcDNAを単離するために、HDL-レセプターの抗体を調製した。ラット肝臓のtotalRNAを調製し、cDNAライブラリーを作製した。200,000個のプラークを得た。抗体スクリーニング法でcDNAライブラリーより、HDL-レセプターのcDNAの単離を行っている。ウサギ、ラットを高コレステロール食で飼育し、その時の肝臓の細胞膜の2つのHDL-レセプターの変動について検討した結果、120kDaのHDL-レセプターのバンドが明らかに濃くなっているのがわかった。以上のことから、HDL-レセプターは120kDaの蛋白質と思われる。今後、120kDaのHDL-レセプターのcDNAクローニングを成功させ、動脈硬化の予防に果たす本レセプターの役割を追究していきたい。
|
