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より安全かつ高機能な細胞シートの作製のための次世代インテリジェント培養表面の開発

研究課題

研究課題/領域番号 16200036
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 医用生体工学・生体材料学
研究機関東京女子医科大学

研究代表者

岡野 光夫  東京女子医科大学, 医学部, 教授 (00130237)

研究分担者 大和 雅之  東京女子医科大学, 医学部, 助教授 (40267117)
清水 達也  東京女子医科大学, 医学部, 助教授 (40318100)
中山 正道  東京女子医科大学, 医学部, 助手 (00338980)
秋山 義勝  東京女子医科大学, 医学部, 助手 (20349640)
原口 裕次  東京女子医科大学, 医学部, 助手 (80272251)
菊池 明彦 (菊地 明彦)  東京女子医科大学, 医学部, 助教授 (40266820)
串田 愛  東京女子医科大学, 医学部, 助手 (10338981)
研究期間 (年度) 2004 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
50,180千円 (直接経費: 38,600千円、間接経費: 11,580千円)
2006年度: 14,690千円 (直接経費: 11,300千円、間接経費: 3,390千円)
2005年度: 14,690千円 (直接経費: 11,300千円、間接経費: 3,390千円)
2004年度: 20,800千円 (直接経費: 16,000千円、間接経費: 4,800千円)
キーワード組織工学 / 再生医療 / 無血清培養 / 温度応答性培養皿 / 細胞成長因子 / インスリン / フィブロネクチン / RGD / シナジー配列
研究概要

ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)をポリスチレン表面にグラフトした温度応答性培養皿を利用した、細胞シート工学的手法をさらに発展させることを目的として、(1)種々の生理活性因子を温度応答性表面に固定化し、ウシ胎児血清(狂牛病等の異種感染を完全には否定できない)や患者自己血清(患者毎に生理活性が異なりうる)を必要としない温度応答性培養床を開発、さらに本技術を応用し(2)細胞増殖を加速化し、短期間で細胞シートを作成することにも成功した。具体的には、温度応答性培養皿表面に、生理活性物質が固定化可能な結合サイトを導入し、RGDのような生理活性ペプチドを導入することで無血清培養条件下での細胞シート回収に成功した。また、スペーサーを介してPHSRN(RDGのシナジー配列)とをRDGと共固定することで細胞接着性が向上し、共固定の細胞培養における有用性を明らかにした。(2)さらに、RGDとインスリンの共固定した表面で細胞培養を行うことで、液中にインスリンが存在するよりも、細胞増殖が加速され短期間に細胞シートが作製できることを明らかにした。生理活性物質の固定にはアビジン、ビオチンケミストリーの利用も有効であることを明らかにした。
今後、既に臨床応用をおこなっている皮膚表皮細胞シート、角膜上皮細胞シートの他、臨床応用を目指している角膜内皮細胞シート、網膜色素上皮細胞シート、心筋細胞シート、肺胞細胞シート等、それぞれの細胞種に最適化した固定化する生理活性子の組み合わせ、各々の因子の濃度を検討中である。

報告書

(4件)
  • 2006 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (38件)

すべて 2006 2005 2004

すべて 雑誌論文 (36件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Limbal epithelial side-population cells have stem cell-like properties, including quiescent state2006

    • 著者名/発表者名
      T.Umemoto et al.
    • 雑誌名

      Stem Cell. 24(1)

      ページ: 74-85

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Structural characterization of bioengineered human corneal endothelial cell sheets fabricated on temperature-responsive culture dishes2006

    • 著者名/発表者名
      T.Ide et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(4)

      ページ: 607-614

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Maskless liquid-crystal-display projection photolithography for improved design flexibility of cellular micropattems2006

    • 著者名/発表者名
      K.Itoga et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(15)

      ページ: 3005-3009

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Transplantable retinal pigment epithelial cell sheets for tissue engineering2006

    • 著者名/発表者名
      A.Kubota et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(19)

      ページ: 3639-3644

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Fabrication of transplantable human oral mucosal epithelial celial cell sheets using temperature-responsive culture inserts without feeder layer cells2006

    • 著者名/発表者名
      D.Murakami et al.
    • 雑誌名

      J. Artif. Organs 9(3)

      ページ: 185-191

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Transplantation of an autologous mesothelial cell sheet prepared from tunica vaginalis prevents post-operative adhesions in a canine model2006

    • 著者名/発表者名
      T.Asano et al.
    • 雑誌名

      Tissue Eng. 12(9)

      ページ: 2629-2637

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Heterotypic cell interactions on a dually patterned surface2006

    • 著者名/発表者名
      Y.Tsuda et al.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun. 348

      ページ: 937-944

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Bio-functionalized thermoresponsive interfaces facilitating cell adhesion and proliferation2006

    • 著者名/発表者名
      H.Hatakeyama et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(29)

      ページ: 5069-5078

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The effect of micropores in the surface of temperature-responsive culture inserts on the fabrication of transplantable canine oral mucosal epithelial cell sheets2006

    • 著者名/発表者名
      D.Murakami et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(32)

      ページ: 5518-5523

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 実績報告書 2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Bio-functionalized thermoresponsive interfaces facilitating cell adhesion and proliferation2006

    • 著者名/発表者名
      H.Hatakeyama, et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials. 27(29)

      ページ: 5069-5078

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Maskless liquid-crystal-display projection photolithography for improved design flexibility of cellular micropatterns2006

    • 著者名/発表者名
      K.Itoga et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 27(15)

      ページ: 3005-3009

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Influence of insulin immobilization to thermoresponsive culture surfaces on cell proliferation and themally induced cell detachment2005

    • 著者名/発表者名
      H.Hatakeyama et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 26(25)

      ページ: 5167-5176

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要 2005 実績報告書
  • [雑誌論文] A noninvasive transfer system for polarized renal tubule epithelial cell sheets using temperature-responsive culture dishes2005

    • 著者名/発表者名
      A.Kushida et al.
    • 雑誌名

      Eur. Cell. Mater. 10(2005)

      ページ: 23-30

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] p57K^<Kip2> is expressed in quiescent mouse bone marrow side population cells2005

    • 著者名/発表者名
      T.Umemoto et al.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun. 337(1)

      ページ: 14-21

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Novel and simple method for isolating autologous mesothelial cells from the tunica vaginalis2005

    • 著者名/発表者名
      T.Asano et al.
    • 雑誌名

      BJU Int. 96(9)

      ページ: 1409-1413

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Rat limbal epithelial side population cells exhibit a distinct expression of stem cell markers that are lacking in side population cells from the central comea2005

    • 著者名/発表者名
      T.Umemoto et al.
    • 雑誌名

      FEBS Lett. 579(29)

      ページ: 6569-6574

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Influence of insulin immobilization to thermoresponsive culture surfaces on cell proliferation and themally induced cell detachment2005

    • 著者名/発表者名
      H.Hatakeyama, et al.
    • 雑誌名

      Biomaterials 26(25)

      ページ: 5167-5176

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] A noninvasive transfer system for polarized renal tubule epithelial cell sheets using temperature-responsive culture dishes2005

    • 著者名/発表者名
      A.Kushida et al.
    • 雑誌名

      Eur.Cell.Mater. 10(2005)

      ページ: 23-30

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] p57^<Kip2> is expressed in quiescent mouse bone marrow side population cells2005

    • 著者名/発表者名
      T.Umemoto et al.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 337(1)

      ページ: 14-21

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Novel and simple method for isolating autologous mesothelial cells form the tunica vaginalis2005

    • 著者名/発表者名
      T.Asano et al.
    • 雑誌名

      BJU Int. 96(9)

      ページ: 1409-1413

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Rat limbal epithelial side population cells exhibit a distinct expression of stem cell markers that are lacking in side population cells from the central cornea2005

    • 著者名/発表者名
      T.Umemoto et al.
    • 雑誌名

      FEBS Lett. 579(29)

      ページ: 6569-6574

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Control of cell Adhesion and detachment using temperature and thermo-responsive copolymer grafted culture surfaces2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Tsuda et al.
    • 雑誌名

      J.Biomed.Mater.Res 69A

      ページ: 70-78

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Temperature-Responsive cell culture surfaces enable On-Off affinity control between cell integrins and RGDS ligands2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara et al.
    • 雑誌名

      Biomacromolecules 5

      ページ: 505-510

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Ultrathin poly(N-isopropylacrylamide)grafted layer on polystyrene surfaces for cell adhesion/detachment contro2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Akiyama et al.
    • 雑誌名

      Langmuir 20

      ページ: 5506-5511

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Immobilization of cell-adhesive peptides to temperature-responsive surfaces facilitates both serum-free cell adhesion and non-invasive cell harves2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara et al.
    • 雑誌名

      Tissue Engineering 10(7)

      ページ: 1125-1135

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Comeal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium2004

    • 著者名/発表者名
      K.Nishida et al.
    • 雑誌名

      N.Engl.J.Med. 351(12)

      ページ: 1187-1196

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Incorporation of new carboxylate functionalized co-monomers to temperature-responsive polymer-grafted cell surfaces2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara et al.
    • 雑誌名

      Surface Science 570

      ページ: 134-141

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Temperature-Responsive cell culture surfaces enable On-Off affinity control between cell integrins and RGDS ligands2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, et al.
    • 雑誌名

      Biomacromolecules 5

      ページ: 505-510

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Immobilization of cell-adhesive peptides to temperature-responsive surfaces facilitates both serum-free cell adhesion and non-invasive cell harves2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, et al.
    • 雑誌名

      Tissue Engineering 10(7)

      ページ: 1125-1135

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Incorporation of new carboxylate functionalized co-monomers to temperature-responsive polymer-grafted cell surfaces2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, et al.
    • 雑誌名

      Surface Science 570

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Control of cell Adhesion and detachment using temperature and thermo-responsive copolymer grafted culture surfaces2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Tsuda, A.kikuchi, M.yamato, Y.sakurai, M.Umezu, T.Okano
    • 雑誌名

      J.Biomed.Mater.Res. 69A

      ページ: 70-78

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Temperature-Responsive cell culture surfaces enable On-Off affinity control between cell integrins and RGDS ligands2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, M.Yamato, T.Aoyagi, A.kikuchi, K.Sakai, T.Okano
    • 雑誌名

      Biomacromolecules 5

      ページ: 505-510

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Ultrathin poly(N-isopropylacrylamide)grafted layer on polystyrene surfaces for cell adhesion/detachment control2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Akiyama, A.kikuchi, M.yamato, T.Okano
    • 雑誌名

      Langmuir 20

      ページ: 5506-5511

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Immobilization of cell-adhesive peptides to temperature-responsive surfaces facilitates both serum-free cell adhesion and non-invasive cell harvest2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, M.yamato, T.Aoyagi, A.kikuchi, K.Sakai, T.Okano
    • 雑誌名

      Tissue Engineering 10(7)

      ページ: 1125-1135

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium2004

    • 著者名/発表者名
      K.Nishida, M.Yamato, Y.Hayashida, K.Watanabe, K.Yamamoto, E.Adachi, S.nagai, A.Kikuchi, N.Maeda, H.Watanabe
    • 雑誌名

      N.Engl.J.Med 351(12)

      ページ: 1187-1196

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Incorporation of new carboxylate functionalized co-monomers to temperature-responsive polymer-grafted cell surfaces2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, M.Yamato, S.Nagai, T.Aoyagi, A.kikuchi, K.sakai, T.okano
    • 雑誌名

      Surface Science 570

      ページ: 134-141

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [図書] Section III. Synthetic systems 2. Chapter 12 Fast shrinkable materials Reflexive Polymers and Hydrogels : Understanding and Designing Fast Responsive Polymeric Systems2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara et al.
    • 総ページ数
      25
    • 出版者
      CRC Press Inc
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2006 研究成果報告書概要
  • [図書] Section III. Synthetic systems 2. Chapter 12 Fast shrinkable materials Reflexive Polymers and Hydrogels : Understanding and Designing Fast Responsive Polymeric Systems (Edited by N.Yui, R.j.Mrsny, and k.Park)2004

    • 著者名/発表者名
      M.Ebara, A.Kikuchi, K.Sakai, T.okano
    • 総ページ数
      25
    • 出版者
      CRC Press Inc.
    • 関連する報告書
      2004 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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