絶滅した動物細胞復活のための新技術開発

• 研究課題/領域番号: 21688020
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 山梨大学 (2013); 独立行政法人理化学研究所 (2009-2012)
• 研究代表者: 若山 清香 山梨大学, 生命環境学部, 助教 (10525918)
• 研究期間 (年度): 2009-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 36,270千円 (直接経費: 27,900千円、間接経費: 8,370千円); 2013年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2012年度: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2011年度: 7,280千円 (直接経費: 5,600千円、間接経費: 1,680千円); 2010年度: 10,010千円 (直接経費: 7,700千円、間接経費: 2,310千円); 2009年度: 10,010千円 (直接経費: 7,700千円、間接経費: 2,310千円)
• キーワード: クローン / 絶滅動物 / 染色体移植 / 体細胞核移植 / 核移植 / 異種間核移植

研究概要

本研究は絶滅動物の凍結死体細胞からクローンをよみがえらせる手法を開発することが目標である。そこで核移植技術を中心に、絶滅動物を復活させるために解決しなければならない問題を想定しマウスを用いて実験を行った。本研究費助成期間内に新たな染色体移植の方法、死滅した動物からの細胞の採取法、ならびに半永久的にクローン動物を継続維持できることなどを証明した。

研究成果

• [雑誌論文] Successful serial recloning in the mouse over multiple generations (2013)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S, Kohda T, Obokata H, Tokoro M, Li C, Terashita Y, Mizutani E, Nguyen VT, Kishigami S, Ishino F, Wakayama T
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 巻: 7, (カバー採用) ページ: 293-297
  • 査読あり
• [雑誌論文] Latrunculin A treatment prevents abnormal chromosome segregation for successful development of cloned embryos (2013)
  • 著者名/発表者名: Terashita Y, Yamagata K, Tokoro M, Wakayama S, Li C, Sato E, Tanemura K, Wakayama T.
  • 雑誌名: Plos One 巻: 8 号: 10 ページ: 1-10
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0078380
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Successful Serial Recloning in the Mouse over Multiple Generations. (2013)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S, Kohda T, Obokata H, Tokoro M, Li C, Terashita Y, Mizutani E, Nguyen VT, Kishigami S, Ishino F, Wakayama T.
  • 雑誌名: Cell Stem Cell 巻: 12 号: 3 ページ: 293-297
  • DOI: 10.1016/j.stem.2013.01.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Latrunculin a can improve the birth rate of cloned mice and simplify the nuclear transfer protocol by gently inhibiting actin polymerization (2012)
  • 著者名/発表者名: Terashita Y, Wakayama S, Yamagata K, Li C, Sato E, Wakayama T
  • 雑誌名: Biol Reprod ページ: 180-180
  • NAID: 130005457607
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescence cell imaging and manipulation using conventional halogen lamp microscopy (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamagata K, Iwamoto D, Terashita Y, Li C, Wakayama S, Hayashi-Takanaka Y, Kimura H, Saeki K, Wakayama T
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(2)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Latrunculin A can improve the birth rate of cloned mice and simplify the nuclear transfer protocol by gently inhibiting actin polymerization. (2012)
  • 著者名/発表者名: Terashita Y, Wakayama S, Yamagata K, Li C, Sato E, Wakayama T.
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 86 号: 6 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1095/biolreprod.111.098764
  • 査読あり
• [雑誌論文] The novel use of modified pig zygotic medium for the efficient culture of the preimplantation mouse embryos (2011)
  • 著者名/発表者名: Amarnath D, Wakayama S, Zhu J, Moawad AR, Wakayama T, Campbell KH
  • 雑誌名: Theriogenology ページ: 1639-46
  • 査読あり
• [雑誌論文] Essential role of paternal chromatin in the regulation of transcriptional activity during mouse preimplantation development (2011)
  • 著者名/発表者名: Bui HT, Wakayama S, Mizutani E, Park KK, Kim JH, Van Thuan N, Wakayama T
  • 雑誌名: Reproduction ページ: 67-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescence cell imaging and manipulation using conventional halogen lamp microscopy (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamagata K
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 号: 2 ページ: e31638-e31638
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0031638
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of healthy cloned mice using enucleated cryopreserved oocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirata S, Fukasawa H, Wakayama S, Wakayama T, Hoshi K
  • 雑誌名: Cell Reprograming 巻: Feb13 ページ: 7-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Essential role of paternal chromatin in the regulation of transcriptional activity during mouse preimplantation development (2011)
  • 著者名/発表者名: Bui HT, Wakayama S, Mizutani E, Park KK, Kim JH, Van Thuan N, Wakayama T
  • 雑誌名: Repriduction 巻: Jan ページ: 67-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of Healthy Cloned Mice Using Enucleated Cryopreserved Oocytes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirata S., et al.
  • 雑誌名: Cellular Reprogramming 巻: 13 ページ: 7-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Essential role of paternal chromatin in the regulation of transcriptional activity during mouse preimplantation development (2011)
  • 著者名/発表者名: Bui HT., et al
  • 雑誌名: Reproduction 巻: 141 ページ: 67-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional full-term placentas formed from parthenogenetic embryos using serial nuclear transfer (2010)
  • 著者名/発表者名: Hikichi T, Ohta H, Wakayama S, Wakayama T
  • 雑誌名: Development ページ: 2841-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of trichostatin A on chromatin remodeling, histone modifications, DNA replication, and transcriptional activity in cloned mouse embryos (2010)
  • 著者名/発表者名: Bui HT, Wakayama S, Kishigami S, Park KK, Kim JH, Thuan NV, Wakayama T
  • 雑誌名: Biol Reprod ページ: 454-63
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of cloned mice from somatic cells, ES cells, and frozen bodies (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S., et al.
  • 雑誌名: Methods Enzymol 巻: 476 ページ: 151-169
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of trichostatin A on chromatin remodeling, histone modifications, DNA replication, and transcriptional activity in cloned mouse embryos. (2010)
  • 著者名/発表者名: Bui T., et al.
  • 雑誌名: Biol.Reprod. 巻: 83 ページ: 454-463
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional full-term placentas formed from parthenogenetic embryos using serial nuclear transfer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hikichi T., et al.
  • 雑誌名: Development 巻: 83 ページ: 2841-2847
  • 査読あり
• [学会発表] マウス精子の宇宙保存へ向けて (2013)
  • 著者名/発表者名: 若山清香, ほか
  • 学会等名: 第106回日本繁殖生物学会大会
• [学会発表] Production of mouse offspring from heated freeze-dried spamatozoa (2011)
  • 著者名/発表者名: S Wakayama
  • 学会等名: The second world congress on reproductive biology
  • 発表場所: Cairns Australia
• [学会発表] マウス初期胚の発生における微小重力の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、河原裕美、李羽中、山縣一夫、弓削類、若山照彦
  • 学会等名: 宇宙利用シンポジウム(第27回)プログラム
  • 発表場所: 宇宙航空研究開発機構・相模原キャンパス相模原市
• [学会発表] 再クローニングに限界はあるのか? (2011)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、若山照彦
  • 学会等名: 第52回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 国際医療福祉大学本校(大田原市)
• [学会発表] マウス初期胚の発生における微小重力の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、河原裕美、李羽中、山縣一夫、弓削類、若山照彦
  • 学会等名: 宇宙利用シンポジウム(第27回)プログラム
  • 発表場所: 宇宙航空研究開発機構・相模原キャンパス 相模原市
• [学会発表] Freeze-dried Sperm Stored for Over One Month at Room Temperature Has Ability to Generate Offspring (2010)
  • 著者名/発表者名: S Wakayama, Y Sakaide, K Yamanaka and T Wakayama
  • 学会等名: 7th Annual Conference of Asian Reproductive Biology Society
  • 発表場所: Equatorial Hotel, Kuala Lumpur, Malaysia
• [学会発表] 卵子由来初期化因子を用いた単一細胞初期化の新しい試み (2010)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、若山照彦
  • 学会等名: 第103回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 北里大学獣医学部十和田市
• [学会発表] 卵子由来初期化因子を用いた単一細胞初期化の新しい試み (2010)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、若山照彦
  • 学会等名: 第103回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 北里大学獣医学部 十和田市
• [学会発表] Freeze-dried Sperm Stored for Over One Month at Room Temperature Has Ability to Generate Offspring. (2010)
  • 著者名/発表者名: S Wakayama, Y Sakaide, K Yamanaka, T Wakayama
  • 学会等名: 7^<th> Annual Conference of Asian Reproductive Biology Society 2010
  • 発表場所: Equatorial Hotel, Kuala Lumpur, Malaysia
• [学会発表] EFFECT OF SPACE ENVIRONMENT ON MAMMALIAN REPRODUCTION (SPACE PUP)
  • 著者名/発表者名: Sayaka Wakayama
  • 学会等名: 10th Annual Conference of Asian Reproductive Biology Society
• [図書] Enhancing SCNT with Chromatin Remodeling Agents. In"Principles of Cloning Second edition". (Ed. Cibelli J. Gurdon J. Wilmut I. Jaenisch R. Lanza R. West MD. Campbell KHS) (2013)
  • 著者名/発表者名: Kishigami S., Nguyen NV, Wakayama S. and Wakayama T
  • 出版者: Academic press, San Diego, USA
• [図書] Cloned mice from embryonic stem cells. In "Advanced in Molecular Biology and Medicine : Stem cells. From Biology to Therapy" Vol. 1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Li C., Wakayama S. and Wakayama T
  • 出版者: Ed. Robert A. Meyers : Wiley-Blackwell Press
• [図書] 生殖工学を用いた新たな動物繁殖技術 (2012)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、李羽中、若山照彦
  • 出版者: 実験医学
• [図書] Generation of healthy cloned mice using enucleated cryopreserved oocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirata S, Fukasawa H, Wakayama S, Wakayama T, Hoshi K
  • 出版者: Cell Reprogram
• [図書] マンモスの再現に向けて (2011)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、若山照彦
  • 出版者: 実験医学
• [図書] Improvement of mouse cloning using nuclear transfer-derived embryonic stem cells and/or histone deacetylase inhibitor (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S and Wakayama T
  • 出版者: Int. J. Dev Biol
• [図書] Production of cloned mice from somatic cells, ES cells, and frozen bodies (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S, Mizutani E, Wakayama T
  • 出版者: Methods Enzymol
• [図書] 「微小重力におけるマウスの受精と発生-人類は宇宙で繁栄できるか-」遺伝 (2010)
  • 著者名/発表者名: 若山清香、河原裕美、弓削類、若山照彦
• [図書] Nuclear transfer ES cells as a new tool for basic biology In : Stem Cells & Regenerative Medicine : From Molecular Embryologyto Tissue Engineering (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S. Mizutani E. and Wakayama
  • 出版者: Humana Press, USA
• [図書] Mouse cloning by nuclear transfer. In : Advanced protocols for animal transgenesis. (ed. Shirley Pease, Thomas L. Saunders) (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S. Thuan NV. and Wakayama T
  • 出版者: Springer New York
• [図書] Nuclear transfer ES cells as a new tool for basic biology In : Stem Cells & Regenerative Medicine : From Molecular Embryologyto Tissue Engineering. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wakayama S., Mizutani E., Wakayama T
  • 出版者: (ed.Krishnarao Appasani Raghu K.Appasani) Humana Press, USA.
• [備考] 山梨大学生命環境学部 附属ライフサイエンス実験施設HP
  • URL: http://www.ccn.yamanashi.ac.jp/~twakayama/LSHP/index.html