研究課題
Ⅰ.sRAGEcDNAを発現するアデノウィルスベクターを作成:COS-TPC法を用いて組み替えアデノウィルスAdex-sRAGEを作製する。進捗状況:ベクター作製済み。Ⅱ.Adex-sRAGEの導入、タンパク発現など機能確認:Adex-sRAGEをHela細胞、各種培養肝細胞に導入し、上清中sRAGEタンパクをWestern Blot 法で確認する。さらにマクロファージ細胞を培養し、リコンビナントHMGB1とsRAGEの分泌が確認されているAdex-sRAGE感染Hela細胞上清を同時添加し、HMGB1のマクロファージ細胞に対するTNF放出刺激が阻害されているか検討する。また、ラット門脈内に投与し、肝臓への導入を行う。投与後血清、肝組織を採取し、タンパク発現がピークとなる時点を検討する。進捗状況:sRAGEを発現するPlasmidを作製し、その機能確認のためTNF放出刺激試験を行った。PlasmidではTNF放出が阻害される事が分かった。
2: おおむね順調に進展している
現在sRAGEを発現するウィルスを作製、増殖しており、それと並行してPlasmidによる治療効果の検討を行っている。
今後Plasmidをラットに導入して肝不全モデルへの治療効果の検討を行う。また同時にウィルスベクターを用いた研究をおこないPlasmidと同様に機能確認、肝不全モデルへの治療効果を検討する。
効率的な調達の結果として残額が生じた。
次年度に使用する消耗品費に組み込み、適切に使用する。
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