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in vitro培養系を用いた減数分裂の開始機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 05454654
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 発生生物学
研究機関熊本大学

研究代表者

安部 眞一 (安倍 眞一 / 阿部 眞一 / 安部 真一)  熊本大学, 理学部, 教授 (90109637)

研究分担者 山本 卓  熊本大学, 理学部, 助手 (90244102)
高宗 和史  熊本大学, 理学部, 講師 (20206882)
研究期間 (年度) 1993 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1995年度)
配分額 *注記
6,200千円 (直接経費: 6,200千円)
1995年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1994年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1993年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
キーワード精子分化 / 精原細胞 / 減数分裂開始 / セルトリ細胞 / FSH / Annexin V / JAK 1 / Activin A / 第一精母細胞 / cDNA / activin A / cDNAクローニング / JAK1 / アネキシン
研究概要

(1)セルトリ細胞による精原細胞の増殖促進作用:精原細胞とセルトリ細胞を分離し、精原細胞のみを旋回培養して±FSHで[^3]thymidineの取り込みを調べても差はみられないが、セルトリ細胞を混ぜると+FSHの場合のみ増殖を活性化する。この系では精原細胞が早く死んでしまうので、精巣を解離、遠心してペレットにし、コラーゲンに埋め込んで培養すると、-FSHでは大部分の精原細胞が死んでしまうが、+FSHでは2週間目で多くの細胞が第一精母細胞へ分化した。この結果、FSHはセルトリ細胞を介して精原細胞の増殖を促進し、減数分裂を開始させることが示唆された。(2)annexin cDNAの分離:精原細胞ステージの精巣と精母細胞ステージの精巣をそれぞれウサギに免疫し、immunodifferential screeningをした結果、減数分裂の開始と共にmRNA量が増加するとクローンとして、annexin5を単離した。(3)イモリ精原細胞の増殖関連分子の検索:チロシンキナーゼの保存配列のプライマーを用いて精原細胞から抽出したRNAを鋳型としてRT-PCRを行ったところ、マウスのJAK1と88%の相同性を示すクローンを得た。in situ hybridization(ISH)の結果、精原細胞でシグナルが検出された。(4)イモリactivin/inhibin βA subunit mRNAの精巣における発現:RT-PCRによりactivin/inhibin βA subunitとβB subunit cDNAを単離した。ISHの結果、セルトリ細胞のみでβA subunit mRNAが検出された。精原細胞ステージの精巣断片を器官培養し、FSHをほ加えたところ3日目にβA subunit mRNAの発現量が増加し、7日目までのその発現が維持された。(5)ヒトactivin Aによるイモリ精原細胞の増殖活性の促進:精巣断片を器官培養し、activin Aを加えると、精原細胞の増殖を著しく促進した。これらの結果は、イモリ精巣においてFSHがセルトリ細胞に働いてactivin A遺伝子の発現を促進し、タンパク質が分泌されて精原細胞に働き、その増殖活性を促進するものと思われる。

報告書

(4件)
  • 1995 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1994 実績報告書
  • 1993 実績報告書
  • 研究成果

    (46件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (46件)

  • [文献書誌] T.Yamamoto: "Diofferential expression of annexin V during spermatogenesis in Cynops pyrrhogaster." Roux Arch. Dev. Biol.(in press). (1996)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Teshima: "Relative amounts of basic nuclear proteins SP4 and SP5 in Xenopus laevis sperm correlate with gene copy number." Develop., Growth and Differ.(in press). (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 安部眞一: "培養系による両生類の精子分化" タンパク質・核酸・酵素(共立出版). 40. 1912-1926 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Maekawa: "Proliferation of newt spermatogonia by mammalian FSH via Sertoli cells in vitro." J. Exp. Zool.272. 363-373 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Promotion of differentiation of newt primary spermatocytes into spermatids by mammalian FSH via Sertoli cells." J. Exp. Zool.272. 374-383 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Takamune: "Characteristic features of preleptotene spermatocytes in Xenopus laevis: Increase in the nuclear volume and first appearance of flattened vesicles in these cells." J. Exp. Zool.273. 264-270 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Takamune: "The occurrence of a gene-encoded variant of nuclear basic protein(SP4)in sperm of Xenopus laevis." Biochem. Biophys. Res. Commun.214. 622-626 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Mita: "Structure of genes for sperm-specific nuclear basic protein (SP4)in Xenopus laevis." Biochem. Biophys. Acta. 1245. 430-438 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Differentiation of primary spermatocytes to elongated spermatids by mammalian FSH in organ culture of testes fragments from the newt, Cynops pyrrhogaster." Develop., Growth and Differ.36. 445-455 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Ariyoshi: "cDNA cloning and expression of Xenopus sperm-specific basic nuclear protein 5(SP5)gene." Molecular Reproduction and Development. 37. 363-369 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Mammalian follicle-stimulating hormone stimulates DNA synthesis in secondary spermatogonia and Sertoli cells in organ culture of testes fragments from the newt, Cynops pyrrhogaster." Zygote. 2. 53-61 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.-I.Abe: "Initiation and stimulation of spermatogenesis in vitro by mammalian follicle-stimulating hormone in the Japanese newt, Cynops pyrrhogaster." Int. J. Dev. Biol.38. 201-208 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shin-ichi Abe: "Biology of Germ Lines-In Animals and Man-"(H.Mohri, M.Takahashi, Ch.Tachi, eds.)" Japan Sci. Soc. Press, Tokyo, 304 (1993)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 安部眞一: "生殖細胞" 共立出版(印刷中), (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 安部眞一;吉里勝利編: "生物科学の基礎" 培風館, 207 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Yamamoto: "Differential epression of annexin V during spermatogenesis in Cynops pyrrhogaster." Roux Arch. Dev.Biol.(in press). (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Teshima: "Relative amount of basic nuclear proteins SP4 and SP5 in Xenopus laevis sperm correlate with gene copy number." Develop., Growth and differ.(in press). (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.-1.Abe: "Amphibian spermatogenesis by culture system (in Japanese)" Protein・Nucleic Aci・Enzyme (Kyoritu Press, Tokyo). 40. 1912-1926 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Maekawa: "Proliferation of newt spermatogonia by mammalian FSH via sertoli cells in vitro." J.Exp.Zool.272. 363-373 (1995)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Promotion of differentiation of newt primary spermatocytes into spermatids by mammalian FSH via Sertoli cells." J.Exp.Zool.272. 374-383 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Takamune: "Characteristic features of preleptotene spermatocytes in Xenopus Laevis : Increase in the nuclear volume and first appearance of flattened vesicles in these cells." J.Exp.Zool.273. 264-270 (1995)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Takamune: "The occurrence of a gene-encoded variant of nuclear basic protein (SP4) in sperm of Xenopus laevis." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 622-626 (1995)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Mita: "Structure of genes for sperm-specific nuclear basic protein (SP4) in Xenopus laevis." Biochem.Biophys.Acta.1245. 430-438 (1995)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Differentiation of primary spermatocytes to elongated spermatids by mammalian FSH in organ culture of teastes fragments from the newt, Cynop pyrrhogaster." Develop., Growth and differ.36. 445-455 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Ariyoshi: "cDNA cloning and expression of Xenopus sperm-specific basic nuclear protein 5 (SP5) gene." Mol.Repr.and Develop.37. 363-369 (1994)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Mammalian follicle-stimulating hormone stimulates DNA synthesis in secondary spermatogonia and Sertoli cells in organ culture of testes fragments from the newt, Cynops pyrrhogaster." Zygote. 2. 53-61 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.-I.Abe: "Initiation and stimulation of sermatogenesis in vitro by mammalian follicle-stimulating hormone in the Japanese newt, Cynops pyrrhogaster." Int.J.Dev.Biol.38. 201-208 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shin-ichi Abe: Mechanism of spermatogenesis in amphibians.-in vitro study- In "Biology of Germ Lines-in Animals and Man-" (H.Mohri, M.Takahashi, Ch.Tachi, eds.). Japan Sci.Soc.Press, Tokyo, 35-50 (1993)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shin-ichi Abe: Spermatogenesis In "Germ Cells" (in Japanese). Kyoritu Press, Tokyo(in press), (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shin-ichi Abe: Development and Biological Information In "Basis of Biological Sciences" (K.Yoshizato, ed.)(in Japanese). Baifukan Press, Tokyo, 81-109 (1994)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Maekawa,Z.-S.Ji and S.-I.Abe: "Proliferation of newt spermatogonia by mammalian FSH via Sertoli cells in vitro." J.Exp.Zool.272. 363-373 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Z.-S.Ji,K.Kubokawa and S.-I.Abe: "Promotion of differentiation of newt primary spermatocytes into spermatids by mammalian FSH via Sertoli cells." J.Exp.Zool.272. 374-383 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] K.Takamune,K.Teshima,M.Maeda and S.-I.Abe: "Characteristic features of preleptotene spermatocytes in Xenopus laevis : Increase in the nuclear volume and first appeararce of flattened vesicles in these cells." J.Exp.Zool.273. 264-270 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] T.Yamamoto,T.Hikino and S.-I.Abe: "Differential expression of annexin V during spermatogenesis in Cynops pyrrhogaster." Roux Arch.Dev.Biol.(in press). (1996)

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      1995 実績報告書
  • [文献書誌] 安部眞一: "生殖細胞" 共立出版(印刷中), (1996)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] K.Maekawa,Z.-S.Ji and S.-I.Abe: "Proliferation of newt spermatogonia by mammalian FSH via sertoli cells in vitro." J.Exp.Zool.in press. (1995)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Z.-S.Ji,K.Kubokawa and S.-I.Abe: "Promotion of differentiation of newt primary spermatocytes into spermatids by mammalian FSH via Sertoli cells." J.Exp.Zool.(in press.). (1995)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Z.-S.Ji and S.-I.Abe: "Differentiation of primary spermatocytes to elongated spermatids by mammalian FSH in organ culture of testes fragments from the newt,Cynops pyrrhogaster." Develop.,Growth and Differ.36. 445-455 (1994)

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      1994 実績報告書
  • [文献書誌] N.Ariyoshi,H.Hiyoshi,Ch.Katagiri and S.-I.Abe: "cDNA cloning and expression of Xenopus sperm-specific basic nuclear protein 5 (SP5) gene." Molecular Reproduction and Development. 37. 363-369 (1994)

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      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Z.-S.Ji and S.-I.Abe: "Mammalian follicle-stimulating hormone stimulates DNA synthesis in secondary spermatogonia and Sertoli cells in organ culture of testes fragments from the newt,Cynops pyrrhogaster." Zygote. 2. 53-61 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] S.-I.Abe and Z.-S.Ji: "Initiation and stimulation of spermatogenesis in vitro by mammalianfollicle-stimulating hormone in the Japanese newt.Cynops pyrrhogaster." Int.J.Dev.Biol.38. 201-208 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] 安部眞一: "「個体発生と生物情報」生物科学の基礎(吉里勝利編)" 培風館, 81-109 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Z.-S.Ji: "Mammlian follicle-stimulating hormone stimulates DNA synthesis in secondary spermatogonia and Setroli cells in organ culture of testes fragments from the newt,Cynops pyrrhogacster." Zygote. (in press). (1994)

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      1993 実績報告書
  • [文献書誌] N.Ariyoshi: "cDNA cloning and expression of Xenopus sperm-specific basic nuclear proteins 5 (8P5) gene." Molecular Reproduction and Development. (in press). (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] S.-I.Abe: "Initiation and stimulation on spermatogenesis in vitro by mammalian follicle-stimulating hormone in the Japanese newt,Cynops pyrrhogaster." International Journal of Developmental Biology. (in press). (1994)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書
  • [文献書誌] S.-I.Abe: "Biology of Germ Lines-In Animals and Man-" Japan Sci.Soc.Press,Tokyo, 314 (1993)

    • 関連する報告書
      1993 実績報告書

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公開日: 1993-04-01   更新日: 2016-04-21  

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