| 研究課題/領域番号 |
15500304
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
実験動物学
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| 研究機関 | (財)実験動物中央研究所 |
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研究代表者 |
後藤 一雄 (財)実験動物中央研究所, 実験動物研究部, 室長 (00205593)
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| 研究分担者 |
外丸 祐介 (外丸 佑介) 広島大学, 自然科学研究支援センター, 助教授 (90309352)
菅原 綾子 (財)実験動物中央研究所, 遺伝研究室, 研究員 (30390743)
葛岡 織子 財団法人実験動物中央研究所, 遺伝研究室, 研究員 (80353481)
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| 研究期間 (年度) |
2003 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2005年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2004年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2003年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | ES細胞 / 核型 / 染色体 / マイコプラズマ / マウス肝炎 / 転座 / ロバートソン型転座 / trisomy / 微生物学的検査 / 品質管理 / 遺伝 / ギムザ染色 / QH染色 / トリソミー |
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| 研究概要 |
マウス胚性幹(ES)細胞は遺伝子改変動物の作出には不可欠の材料である。これまでの、我々を含めた内外の報告から、マウスES細胞は継代によって染色体数が変化すること、たとえ染色体数が正常(40本)であってもES細胞に導入された遺伝子が次代に受け継がれない場合があること、およびマイコプラズマ、マウス肝炎ウイルスなどに汚染される可能性があることなどが知られている。本実験で我々は43施設由来84細胞株(129系統由来59検体、TT2由来16検体およびC57肌由来9検体)について染色体異常の状況を調べた。その結果染色体数異常を示す検体が30%以上見られ染色体検査の必要性が示された。また、無作為に選んだ92株について核型分析を行ったところ染色体異常は、8番および11番染色体のトリソミーが有意に見られた他、4株にNo.8染色体由来の同腕染色体(i(8))含む複雑な核型異常を見出した。本実験で染色体数異常がgermline transmissionに影響することが示されたが、細胞の分化度など他の影響も考慮する必要性が認められた。微生物学的検査ではいずれの検体もマイコプラズマ(Mycoplasma spp)およびマウス肝炎ウイルスの汚染は認められず微生物学的に良好に維持されていることが確認された。しかし、ES細胞の汚染によってマウスが感染し、動物施設が汚染されることを考えると、これら微生物の検査を行うことは有意義であると思われる。今回行われた、実験結果からマウスES細胞の品質管理として1)染色体数検査、2)核型検査、3)マイコプラズマやマウス肝炎ウイルスなど微生物の汚染検査を行うことで、効率よい動物の作出が可能になると思われる。今後ES細胞の分化度など他の品質管理マーカー等を検討することで、より確実な,ES細胞の品質管理システムが構築できると考えられた。
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