ウシバベシアによる赤血球侵入評価系の確立

• 研究課題/領域番号: 15K14862
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 帯広畜産大学
• 研究代表者: 横山 直明 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (80301802)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: バベシア / 赤血球 / 侵入 / 評価系 / ワクチン

研究成果の概要

牛バベシア（Babesia bovis）培養物を低温感作させて、放出された赤血球外メロゾイトを回収した。次に、このメロゾイトを用いてバベシアによる赤血球侵入評価系を確立した。さらに、この評価系を用いて、牛バベシアのBOV57抗原の機能を解析した。その結果、BOV57抗原に特異的な抗体は、メロゾイトによる赤血球侵入を有意に阻害することが判明した。すなわち、BOV57抗原はメロゾイトの赤血球侵入に重要な役割を果たし、牛バベシア病に対する新たなサブユニットワクチンの候補抗原として活用できる可能性を明らかにした。

研究成果

• [国際共同研究] 国立獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] 国立生命科学大学・獣医学研究所(モンゴル)
• [国際共同研究] フエ大学/フエ農林大学(ベトナム)
• [国際共同研究] 国立畜産局/カセタルト大学(タイ)
• [国際共同研究] サダト大学(エジプト)
• [国際共同研究] 獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] フエ大学/フエ農林大学(ベトナム)
• [国際共同研究] モンゴル農業大学(モンゴル)
• [国際共同研究] 国立動物科学研究所(タイ)
• [雑誌論文] Babesia bovis BOV57, a Theileria parva P67 homolog, is an invasion-related, neutralization-sensitive antigen (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishizaki Takahiro、Sivakumar Thillaiampalam、Hayashida Kyoko、Takemae Hitoshi、Tuvshintulga Bumduuren、Munkhjargal Tserendorj、Guswanto Azirwan、Igarashi Ikuo、Yokoyama Naoaki
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 54 ページ: 138-145
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2017.06.025
  • NAID: 120006411414
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Type-specific PCR assays for Babesia bovis msa-1 genotypes in Asia: Revisiting the genetic diversity in Sri Lanka, Mongolia, and Vietnam. (2016)
  • 著者名/発表者名: Liyanagunawardena N, Sivakumar T, Kothalawala H, Silva SS, Battsetseg B, Lan DT, Inoue N, Igarashi I, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Infect Genet Evol. 巻: 37 ページ: 64-69
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2015.10.029
  • NAID: 120006390924
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] RBC Invasion and invasion-inhibition assays using free merozoites isolated after cold treatment of Babesia bovis in vitro culture. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishizaki, T., Sivakumar, T., Hayashida, K., Tuvshintulga, B., Igarashi, I., and Yokoyama N.
  • 雑誌名: Exp. Parasitol. 巻: 166 ページ: 10-15
  • DOI: 10.1016/j.exppara.2016.03.010
  • NAID: 120006390946
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic diversity and antigenicity variation of Babesia bovis merozoite surface antigen-1 (MSA-1) in Thailand. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tattiyapong, M., Sivakumar, T., Takemae, H., Simking, P., Jittapalapong, S., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Infect. Genet. Evol. 巻: 41 ページ: 255-261
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2016.04.021
  • NAID: 120006390947
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Epidemiology of bovine hemoprotozoa parasites in cattle and water buffalo in Vietnam (2016)
  • 著者名/発表者名: Weerasooriya, G., Sivakumar, T., Lan, D.T., Long, P.T., Takemae, H., Igarashi, I., Inoue, N., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 78 号: 8 ページ: 1361-1367
  • DOI: 10.1292/jvms.16-0099
  • NAID: 130005261519
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] A longitudinal study of Babesia and Theileria infections in cattle in Sri Lanka. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T., Kothalawala, H., Weerasooriya, G., Silva, S.S.P., Puvanendiran, S., Munkhjargal, T., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports 巻: 6 ページ: 20-27
  • DOI: 10.1016/j.vprsr.2016.11.009
  • NAID: 120006390921
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Calcium ions are involved in egress of <i>Babesia bovis</i> merozoites from bovine erythrocytes (2015)
  • 著者名/発表者名: Mossaad, E., Asada, M., Nakatani, D., Inoue, N., Yokoyama, N., Kaneko, O., and Kawazu, S.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 77 号: 1 ページ: 53-58
  • DOI: 10.1292/jvms.14-0391
  • NAID: 130004693911
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] An epidemiological survey of bovine Babesia and Theileria parasites in cattle, buffaloes, and sheep in Egypt. (2015)
  • 著者名/発表者名: Elsify, A., Sivakumar, T., Nayel, M., Salama, A., Elkhtam, A., Rizk, M., Mosaab, O., Sultan, K., Elsayed, S., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Parasitol. Int. 巻: 64 号: 1 ページ: 79-85
  • DOI: 10.1016/j.parint.2014.10.002
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Genetic variations in merozoite surface antigen genes of Babesia bovis detected in Vietnamese cattle and water buffaloes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, N., Sivakumar, T., Tuvshintulga, B., Hayashida, K., Igarashi, I., Inoue, N., Long, P.T., and Lan, D.T.
  • 雑誌名: Infect. Genet. Evol. 巻: 30 ページ: 288-295
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Optimization of a Fluorescence-Based Assay for Large-Scale Drug Screening against Babesia and Theileria Parasites. (2015)
  • 著者名/発表者名: Rizk, M.A., El-Sayed, S.A., Terkawi, M.A., Youssef, M.A., El Said el Sel, S., Elsayed, G., El-Khodery, S., El-Ashker, M., Elsify, A., Omar, M., Salama, A., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 10 号: 4 ページ: e0125276-e0125276
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0125276
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Asada M, Yahata K, Hakimi H, Yokoyama N, Igarashi I, Kaneko O, Suarez CE, Kawazu SI. Transfection of Babesia bovis by double selection with WR99210 and Blasticidin-S and its application for functional analysis of thioredoxin peroxidase-1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Asada M, Yahata K, Hakimi H, Yokoyama N, Igarashi I, Kaneko O, Suarez CE, Kawazu SI
  • 雑誌名: PLOS One 巻: 10(5) 号: 5 ページ: e0125993-e0125993
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0125993
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Evaluation of inhibitory effect of methylene blue against Babesia and Theileria parasites. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tuvshintulga, B., Sivakumar, T., Salama, A.A., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: J. Protozool. Res. 巻: 25 ページ: 18-28
  • NAID: 120006391034
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Analysis of the genetic diversity of Babesia bovis msa-1 in Thailand using type-specific polymerase chain reaction. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tattiyapong, M., Sivakumar, T., Takemae, H., Simking, P., Jittapalapong, S., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: J. Protozool. Res. 巻: 25 ページ: 38-43
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Cocktail of Theileria equi antigens for detecting infection in equines. (2015)
  • 著者名/発表者名: El-Sayed, S.A.E.-S., Rizk, M.A., Terkawi, M.A., Mousa, A., El-Said, E.-S.E.-S., Elsayed, G., Fouda, M., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 巻: 5 号: 12 ページ: 977-981
  • DOI: 10.1016/j.apjtb.2015.09.001
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] Babesia bovis BOV57, a Theileria parva P67 homolog, is an invasion-related, neutralization-sensitive antigen. (2017)
  • 著者名/発表者名: 石崎隆弘、ティライアンパラム シバクマール、林田京子、五十嵐郁男、横山直明
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] スリランカ国の牛におけるバベシア及びタイレリアの分子疫学調査 (2016)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar Thillaiampalam、五十嵐郁男、横山直明
  • 学会等名: 第57回日本熱帯医学学会大会
  • 発表場所: 一橋大学（東京都千代田区）
  • 年月日: 2016-11-05
• [学会発表] Effect of cold treatment of Babesia bovis-infected erythrocytes: A novel technique to isolate free, viable, invasion-competent merozites. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, N., Ishizaki, T., Sivakumar, T., and Igarashi, I.
  • 学会等名: 第56回日本熱帯医学会大会
  • 発表場所: 大阪大学（大阪府吹田市）
  • 年月日: 2015-12-04
• [学会発表] The molecular diagnostic tools for bovine piroplasmosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, N.
  • 学会等名: 57th Annual Convention of the Sri Lanka Veterinary Association
  • 発表場所: Oak-Ray and Earl's Regency (Kandy, Sri Lanka)
  • 年月日: 2015-07-19
  • 国際学会 / 招待講演
• [備考] 帯広畜産大学・原虫病研究センター ホームページ
  • URL: http://www.obihiro.ac.jp/~protozoa/index.html