特異性の高い新規ユビキチンリガーゼ基質同定法の開発

• 研究課題/領域番号: 15K15058
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 渡部 昌 北海道大学, 医学研究科, 助教 (10632424)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2016年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: ユビキチン / ユビキチンリガーゼ

研究成果の概要

ユビキチン化修飾の基質特異性はユビキチンリガーゼ(E3)が決定しているため、個々のE3に特異的な基質を同定しそのユビキチン化部位を決定することは様々な生命現象を理解する上で重要となる。近年、ユビキチン結合ドメイン(UBA)とE3の融合プローブによるLigase trap法、ユビキチン高親和性ドメイン（TUBE）とユビキチン化を受けたペプチドを認識するK-εGG抗体を組み合わせるTR-TUBE法が提唱された。私たちはこの手法にいくつかの改良を加えてさらに進展させた基質同定法の開発を試み、感度の向上に成功している。この手法を用いることで、E3の機能解析が加速することが期待できると思われる。

研究成果

• [雑誌論文] TRIM proteins and diseases. (2017)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, M. and Hatakeyama, S
  • 雑誌名: J. Biochem. 巻: 161 ページ: 135-144
  • DOI: 10.1093/jb/mvw087
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The novel heart-specific RING finger protein 207 is involved in energy metabolism in cardiomyocytes. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mizushima, W., Takahashi , H., Watanabe, M., Kinugawa, S., Matsushima, S., Takada, S., Yokota, T., Furihata, T., Matsumoto, J., Tsuda, M., Chiba, I., Nagashima, S., Yanagi, S., Matsumoto, M., Nakayama, K.I., Tsutsui, H. and Hatakeyama, S.
  • 雑誌名: J. Mol. Cell. Cardiol. 巻: 100 ページ: 43-53
  • DOI: 10.1016/j.yjmcc.2016.09.013
  • NAID: 120006360069
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] p53 represses the transcription of snRNA genes by preventing the formation of little elongation complex (2016)
  • 著者名/発表者名: Anwar, D., Takahashia, H., Watanabe, M., Suzuki, M., Fukuda, S., Hatakeyama, S.
  • 雑誌名: Biochim. Biophys. Acta-Gene Regul. Mech. 巻: 1859 号: 8 ページ: 975-982
  • DOI: 10.1016/j.bbagrm.2016.06.001
  • NAID: 120006328999
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] TRIM39 negatively regulates the NFκB-mediated signaling pathway through stabilization of Cactin (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M, Watanabe M, Nakamaru Y, Takagi D, Takahashi H, Fukuda S, Hatakeyama S.
  • 雑誌名: Cell Mol Life Sci. 巻: ７３ 号: 5 ページ: 1085-1101
  • DOI: 10.1007/s00018-015-2040-x
  • NAID: 120005981342
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The E3 ubiquitin ligase TRIM23 regulates adipocyte differentiation via stabilization of the adipocyte activator PPAR gamma. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, M., Takahashi, H., Saeki, Y., Ozaki, T., Itoh, S., Suzuki, M., Mizushima, W., Tanaka, K. and Hatakeyama, S.
  • 雑誌名: eLIFE 巻: 4
  • DOI: 10.7554/elife.05615
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] The E3 ubiquitin ligase TRIM23 regulates adipocyte differentiation via stabilization of the adipogenic activator PPARγ (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡部 昌, 高橋秀尚, 畠山鎮次
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県・横浜市）
  • 年月日: 2016-12-01
  • 招待講演
• [学会発表] ユビキチンリガーゼTRIM23は非定型ポリユビキチン化によるPPARγの安定化を介して脂肪細胞分化を制御する (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡部 昌, 高橋秀尚, 畠山鎮次
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 東北大学川内北キャンパス （宮城県・仙台市）
  • 年月日: 2016-09-27
• [学会発表] ユビキチンE3リガーゼTRIM23は非定型ポリユビキチン化によるPPARγの安定化を介して脂肪細胞分化を制御する (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡部 昌, 高橋秀尚, 畠山鎮次
  • 学会等名: 第68回日本細胞生物学会大会
  • 発表場所: 京都テルサ（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-06-15
• [学会発表] ユビキチンリガーゼTRIM23はPPARγの安定化を介して脂肪細胞分化を制御する (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡部 昌, 高橋秀尚, 畠山鎮次
  • 学会等名: 第89回日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2016-04-21
• [学会発表] ユビキチンリガーゼTRIM23はPPARγの安定化を介して脂肪細胞分化を制御する (2016)
  • 著者名/発表者名: 渡部 昌, 高橋秀尚, 畠山鎮次
  • 学会等名: 第93回日本生理学会大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（北海道・札幌市）
  • 年月日: 2016-03-24
• [学会発表] The ubiquitin E3 ligase TRIM23 regulates adipocyte differentiation via stabilization of the adipogenic activator PPARγ. (2015)
  • 著者名/発表者名: Masashi Watanabe
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting on the Ubiquitin Family
  • 発表場所: New York(USA)
  • 年月日: 2015-04-21
  • 国際学会
• [図書] Advances in Medicine and Biology. Volume 120 (2017)
  • 著者名/発表者名: Masashi Watanabe and Shigetsugu Hatakeyama
  • 総ページ数: 23
  • 出版者: Nova Science Publishers