インビトロ腸炎モデルの構築とそれを利用した抗炎症性食品因子の探索と抑制機構の解明

• 研究課題/領域番号: 21300276
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 食生活学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 水野 雅史 神戸大学, 大学院・農学研究科, 教授 (00212233)
• 研究分担者: 西谷 洋輔 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環重点研究部, 助教 (80457093)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 19,370千円 (直接経費: 14,900千円、間接経費: 4,470千円); 2011年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円); 2010年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円); 2009年度: 13,780千円 (直接経費: 10,600千円、間接経費: 3,180千円)
• キーワード: 健康と食生活 / 炎症性腸疾患 / マクロファージ / インターロイキン-8 / レンチナン / エンドサイトーシス / 腫瘍壊死因子 / インターナリゼイション / キノコ / プロバイオティックス / インターフェロン-γ / ポリフェノール / 乳酸菌

研究概要

マクロファージ様RAW264. 7細胞と小腸上皮様Caco-2細胞を共存培養し、基底膜側へリポ多糖(LPS)を処理することでインビトロ腸炎モデル系を構築した。この系を用いて抗炎症性を示す食品因子を検索したところ、ポリフェノール類としてクルクミンとルテオリン、多糖類としてフコイダンおよびレンチナンに活性が認められた。これらのうち、フコイダンに関しては小腸上皮細胞との相互反応によって発生する過酸化水素が重要であることが判明した。

研究成果

• [雑誌論文] β-Glucan from Lentinus edodes inhibits nitric oxide and tumor necrosis factor-□production and phosphorylation of mitogen-activated protein kinases in lipopolysaccharide-stimulated murine RAW 264. 7 (2012)
  • 著者名/発表者名: Xu, X. J., Yasuda, M., Tsuruta, S., Mizuno, M., and Ashida, H.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 287 ページ: 871-878
  • 査読あり
• [雑誌論文] TLR ligands of Lactobacillus sakei LK-117 isolated from seed mash for brewing sake are potent inducers of IL-12 (2011)
  • 著者名/発表者名: Masuda, Y., Takahashi, T., Yoshida, K., Nishitani, Y., Mizuno, M. and Mizoguchi, H.
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioeng. 巻: 112 ページ: 363-368
  • NAID: 110008761493
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oral treatment with extract of Agaricus blazei Murill enhanced Th1 response through intestinal epithelial cells and suppressed OVA-sensitized allergy in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Bouike, G., Nishitani, Y., Shiomi, H., Yoshida, M., Azuma, T., Hashimoto, T., Kanazawa, K. and Mizuno, M.
  • 雑誌名: Evid. Based Complement. Alternat 巻: Volume 号: 1 ページ: 11-11
  • DOI: 10.1155/2011/532180
  • 査読あり
• [雑誌論文] β-Glucan from lentinus edodes inhibits NO and TNF-α production and phosphorylation of mitogen-activated protein kinases in LPS-stimulated murine RAW 264.7 (2011)
  • 著者名/発表者名: Xu, X.J., Yasuda, M., Tsuruta, S., Mizuno, M., Ashida, H.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 287(2) ページ: 871-878
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory activities of Lactococcus lactis subsp. cremoris FC in in vitro and in vivo gut inflammation (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y. and Mizuno, M.
  • 雑誌名: Biosci. Microflora 巻: 29 ページ: 169-178
  • 査読あり
• [雑誌論文] Membrane fusion process and assembly of cell wall during cytokinesis in the brown alga (2010)
  • 著者名/発表者名: Nagasato, C., Inoue, A., Mizuno, M., Kanazawa, K., Ojima, T., Okuda, K. and Motomura, T.
  • 雑誌名: Silvetia babingtonii 巻: 232 ページ: 287-298
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipoxin A4 reduces lipopolysaccharide-induced inflammation in macrophages and intestinal epithelial cells through inhibition of NF-kappaB activation (2010)
  • 著者名/発表者名: Kure, I., Nishiumi, S., Nishitani, Y., Tanoue, T., Ishida, T., Mizuno, M., Fujita, T., Kutsumi, H., Arita, M., Azuma, T. and Yoshida, M.
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Exp. Ther. 巻: 332 ページ: 541-548
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory activities of Lactococcus lactis subsp.cremoris FC in in vitro and in vivo gut inflammation (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y.Mizuno, M.
  • 雑誌名: Biosci.Microflora 巻: 29(4) ページ: 169-178
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oral treatment with extract of Agaricus blazei Murill enhanced Th1 response through intestinal epithelial cells and suppressed OVA-sensitized allergy in mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Bouike, G., Nishitani, Y., Shiomi, H., Yoshida, M., Azuma, T., Hashimoto, T., Kanazawa, K., Mizuno, M.
  • 雑誌名: Evid.Based Complement. Altermat.Med. 巻: ID532180 ページ: 1-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Different suppressive effects of fucoidan and lentinan on IL-8 mRNA expression in in vitro gut inflammation (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizuno, M., Nishitani, Y., Hashimoto, T. and Kanazawa, K.
  • 雑誌名: Biosci. Biotech. Biochem. 巻: 73 ページ: 2324-2325
  • NAID: 10027547145
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lactococcus lactis subsp. cremoris FC alleviates symptoms of colitis induced by dextran sulfate sodium in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y., Tanoue, T., Yamada, K., Ishida, T., Yoshida, M., Azuma, T. and Mizuno, M.
  • 雑誌名: Int. Immunopharmacol. 巻: 9 ページ: 1444-1451
  • 査読あり
• [雑誌論文] The distribution and accumulation of fucoxanthin and its metabolites after oral-administration in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, T., Ozaki, Y., Taminato, M., Das, S. K., Mizuno, M., Yoshimura, K., Maoka, T. and Kanazawa, K.
  • 雑誌名: Br. J. Nutr 巻: 102 ページ: 242-248
  • NAID: 120001919651
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anti-inflammatory effect of Bifidobacterium longum on macrophage-like THP-1 cells via epithelial cell Caco-2 (2009)
  • 著者名/発表者名: Takizawa, R., Nishitani, Y., Mizuno, M. and Osawa, R.
  • 雑誌名: Biosci. Microflora 巻: 28 ページ: 45-48
  • NAID: 10026974720
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantitation and localization of fucoidan in Laminaria japonica using a novel antibody (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizuno, M., Nishitani, Y., Tanoue, T., Matoba, Y., Ojima, T., Hashimoto, T. and Kanazawa, K.
  • 雑誌名: Biosci. Biotech. Biochem 巻: 73 ページ: 335-338
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lactococcus lactis subsp.cremoris FC alleviates symptoms of colitis induced by dextran sulfate sodium in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y., Tanoue, T., Yamada, K., Ishida, T., Yoshida, M., Azuma, T., Mizuno, M.
  • 雑誌名: International Immunopharmacology 9 ページ: 1444-1451
  • 査読あり
• [雑誌論文] Different suppressive effects of fucoidan and lentinan on IL-8 mRNA expression in in vitro gut inflammation (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizuno, M., Nishitani, Y., Hashimoto, T., Kanazawa, K.
  • 雑誌名: Bioscience, Biotechnology and Biochemistry 73 ページ: 2324-2325
  • NAID: 10027547145
  • 査読あり
• [学会発表] レンチナンの腸管炎症抑制機構:小腸上皮様Caco-2細胞のTNFR1の局在性に及ぼす影響について (2012)
  • 著者名/発表者名: 水野雅史
  • 学会等名: 日本農芸化学会平成24年度大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-03-24
• [学会発表] レンチナンの腸管炎症抑制効果:小腸上皮様Caco-2細胞のTNFR1の局在性に及ぼす影響について (2012)
  • 著者名/発表者名: 西谷洋輔、水野雅史
  • 学会等名: 日本農芸化学会2012年度大会
  • 発表場所: 京都好大学(京都府)
  • 年月日: 2012-03-24
• [学会発表] Lentinan ameliorates gut inflammation in an in vivo and an in vitro model : a possible inhibition mechanism on IL-8 mRNA expression in intestinal epithelial cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y., Zhang, L., Kanazawa, K., Mizuno, M.
  • 学会等名: The 6th International Medicinal Mushroom Conferenee
  • 発表場所: クロアチア、ザグレブ
  • 年月日: 2011-09-26
• [学会発表] Gut anti-inflammatory activity of lentinan : influence on IL-8 and TNFR1 expression in intestinal epithelial-like Caco-2 cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y., Zhang, L., Mizuno, M.
  • 学会等名: 16th European Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: イタリア、ソレント
  • 年月日: 2011-07-05
• [学会発表] Gut anti-inflammator activity of lentinan : influence on IL-8 and TNFR1 expression in intestinal epithelial-like Caco-2 cell (2011)
  • 著者名/発表者名: Masashi Mizuno
  • 学会等名: 16th European Carbohydrate Symposiu
  • 発表場所: Sorrento, Ital
  • 年月日: 2011-07-04
• [学会発表] In vitro腸炎モデルのおけるレンチナンの炎症抑制機構の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 水野雅史
  • 学会等名: 日本農芸化学会平成23年度大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] Lentinan inhibits gut inflammation through alteration of TNFR1 distribution in intestinal epithelial cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishitani, Y., Zhang, L., Mizuno, M.
  • 学会等名: International Conference and Exhibition on Nutraceuticals and Functional Foods
  • 発表場所: ロイトン札幌ホテル(北海道)
• [学会発表] Attenuation of the inflammatory response in a mouse colitis model by antioxidant luteolin : Key role of aglycone in inactivation of macrophages co-cultured with intestinal epithelial cells in vitro (2010)
  • 著者名/発表者名: Yosuke Nishitani, Masashi Mizuno
  • 学会等名: Society of Free Radical Biology and Medicine 17th Annual Meeting
  • 発表場所: Orlando, USA
  • 年月日: 2010-11-18
• [学会発表] In vivo腸管炎症モデルを用いたレンチナン経口投与の炎症性腸疾患抑制効果 (2010)
  • 著者名/発表者名: 張玲、西谷洋輔、吉田優、東健、水野雅史
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会
  • 発表場所: 静岡県コンベンションアーツセンター(静岡県)
  • 年月日: 2010-09-15
• [学会発表] 食用キノコであるガルガルの炎症性腸疾患抑制効果とその活性物質の分離 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡部純也、原田栄津子、森園智浩、吉田美友紀、河岸洋和、水野雅史
  • 学会等名: 日本食品科学工学会
  • 発表場所: 東京農業大学(東京都)
  • 年月日: 2010-09-02
• [学会発表] βグルカンの機能性解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 水野雅史
  • 学会等名: 第3回 βグルカンシンポジウムin大阪
  • 発表場所: TKP大阪本町ビジネスセンター(大阪府)
  • 年月日: 2010-03-12
• [学会発表] Suppressive effect of lentinan on IL-8 and TNFR1 mRNA expression in in vitro gut inflammation model (2009)
  • 著者名/発表者名: Masashi Mizuno, Takeshi Tanoue, Yosuke Nishitani
  • 学会等名: European Polysaccharide Network Of Excellence 2009
  • 発表場所: Turke、Finland
  • 年月日: 2009-09-22
• [学会発表] Lactococcus lactis subsp.cremoris FC alleviates symptoms of colitisinduced by dextran sulfate sodium in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Y.Nishitani, K.Kanazawa, M.Mizuno
  • 学会等名: The Australian Society for Microbiology 2009
  • 発表場所: Perth、Australia
  • 年月日: 2009-07-08
• [図書] プロバイオティクスの炎症性腸疾患抑制作用、免疫機能性食品の基礎と応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 西谷洋輔、水野雅史
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] βグルカン高含有食品素材の免疫賦活活性、βグルカンの基礎と応用-感染、抗がん、ならびに機能性食品へのβグルカンの関与- (2010)
  • 著者名/発表者名: 水野雅史
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] In vitro and in vivo immunnomodulatory and anti-allergic effects of Agaricus blazei Murill, In Dietary Components and Immune Functio (2010)
  • 著者名/発表者名: Mizuno, M.
  • 出版者: Humana Pres
• [図書] In Dietary Components and Immune Function (2010)
  • 著者名/発表者名: Mizuno, M.
  • 総ページ数: 693
  • 出版者: Humana Press
• [図書] βグルカンの基礎と応用-感染、抗がん、ならびに機能性食品へのβグルカンの関与 (2010)
  • 著者名/発表者名: 水野雅史
  • 総ページ数: 283
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] 免疫機能性食品の基礎と応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 西谷洋輔、水野雅史
  • 総ページ数: 227
  • 出版者: シーエムシー出版
• [備考]
  • URL: http://www.research.kobe-u.ac.jp/ans-glyco-chain/
• [備考]
  • URL: http://www.research.kobe-u.ac.jp/ans-glyco-chain/
• [備考]
  • URL: http://www.research.kobe-u.ac.jp/ans-glyco-chain/