タンパク質の安定性向上技術の開発とバイオ燃料生産への応用

• 研究課題/領域番号: 21760638
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 田中 勉 神戸大学, 自然科学系・先端融合研究環重点研究部, 助教 (90436551)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2010年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2009年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: タンパク質 / 酵素 / 熱安定性

研究概要

本研究では、酵素を用いた蛋白質の安定性向上技術の開発を行った。本研究ではタンパク質連結酵素Sortaseに注目し、この酵素を用いて目的タンパク質のN末端とC末端を連結することで、タンパク質を安定化させる技術の開発を試みた。EGFPをモデルタンパク質として用いて両末端を連結させ、熱安定性を向上させる事ができた。さらに、効率的な連結のためには、両末端におけるリンカー配列が重要であることも示された。

研究成果

• [雑誌論文] Site-specific tetrameric streptavidin-protein conjugation using sortase A. (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, T., Sawamoto, S., Sakamoto, T., Tanaka T., Fukuda, H., Kondo, A.
  • 雑誌名: Journal of Biotechnology 151(1-2) ページ: 37-42
• [雑誌論文] Site-specific tetrameric streptavidin-protein conjugation using sortase A. (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto, T., Sawamoto, S., Sakamoto, T., Tanaka, T., Fukuda, H., Kondo, A.
  • 雑誌名: Journal of Biotechnology 巻: 152 ページ: 37-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enzyme-mediated site-specific antibody-protein modification using a ZZ domain as a linker. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, T., Sawamoto, S., Tanaka T., Fukuda, H., Kondo, A.
  • 雑誌名: Bioconjugate Chemistry ページ: 2227-2233
• [雑誌論文] Enzyme-mediated site-specific antibody-protein modification using a ZZ domain as a linker. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, T., Sawamoto, S., Tanaka, T., Fukuda, H., Kondo, A.
  • 雑誌名: Bioconjugate Chemistry 巻: 21 ページ: 2227-2233
  • 査読あり
• [学会発表] 長期エタノール発酵に向けたアミラーゼ表層提示発現酵母株の創製 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山川瞬一・山田亮祐・田中勉・荻野千秋・近藤昭彦
  • 学会等名: 化学工学会 第76年会
  • 発表場所: 東京農工大学(東京都)
• [学会発表] 酵素を用いた抗体結合ドメインー機能性タンパク質調製法の最適化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂本崇幸、田中勉、近藤昭彦
  • 学会等名: 化学工学会第75年会
  • 発表場所: 鹿児島大学
  • 年月日: 2010-03-20
• [学会発表] 酵素を用いた抗体結合ドメインー機能性タンパク質調製法の最適化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂本崇幸、田中勉、近藤昭彦
  • 学会等名: 化学工学会 第75年会
  • 発表場所: 鹿児島大学(鹿児島県)
  • 年月日: 2010-03-20
• [学会発表] Sortaseを用いたstreptavidinの新規修飾技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 松本拓也・田中勉・近藤昭彦
  • 学会等名: 生物工学会62回大会
  • 発表場所: 宮崎シーガイアワールドコンベンションセンターサミット
• [学会発表] Sortaseを用いたstreptavidinの新規修飾技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 松本拓也・田中勉・近藤昭彦
  • 学会等名: 生物工学会62回大会
  • 発表場所: (宮崎県)宮崎シーガイアワールドコンベンションセンターサミット
• [学会発表] セルラーゼ発現最適化バランス酵母を用いたセルロースからのエタノール発酵 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山田亮祐・田中勉・荻野千秋・近藤昭彦
  • 学会等名: 生物工学会62回大会
  • 発表場所: (宮崎県)宮崎シーガイアワールドコンベンションセンターサミット
• [学会発表] Sortase-mediated Site-specific protein conjugation (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsutomu Tanaka, Takayuki Sakamoto, Kanako Wakamura, Ryosuke Takase, Takuya Matsumoto, Shiori Sawamoto, Akihiko Kondo.
  • 学会等名: Enzyme Engineering XX
  • 発表場所: Groningen, the Netherlands
• [学会発表] Enzyme-mediated Antibody-Protein conjugation (2009)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Sakamoto, Tsutomu Tanaka, Akihiko Kondo.
  • 学会等名: APBioChEC 2009
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] Enzyme-mediated Site-specific protein modification (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsutomu Tanaka, Takayuki Sakamoto, Kanako Wakamura, Ryosuke Takase, Takuya Matsumoto, Shiori Sawamoto, Akihiko Kondo.
  • 学会等名: APBioChEC 2009
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] Enzyme-mediated Antibody-Protein conjugation (2009)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Sakamoto, Tsutomu Tanaka, Akihiko Kondo
  • 学会等名: APBioChEC 2009
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)
• [学会発表] Enzyme-mediated Site-specific protein modification (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsutomu Tanaka, Takayuki Sakamoto, Kanako Wakamura, Ryosuke Takase, Takuya Matsumoto, Shiori Sawamoto, Akihiko Kondo
  • 学会等名: APBioChEC 2009
  • 発表場所: 神戸国際会議場(兵庫県)