クローン病の発症における p40phox の役割の解明と創薬

• 研究課題/領域番号: 23659137
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 齋藤 尚亮 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環バイオシグナル研究センター, 教授 (60178499)
• 研究分担者: 上山 健彦 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環バイオシグナル研究センター, 准教授 (80346254) ; 楠 正人 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50192026)
• 連携研究者: 楠 正人 三重大学, 医学(系)研究科(研究院) (50192026)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: クローン病 / p40phox / 活性酸素 / NADPH / oxidase / 遺伝子異常 / 乳幼児 / オートファジー / モデルマウス / 遺伝子解析

研究概要

本研究では、p40phoxの遺伝子異常によるCGD腸炎とクローン病の発症機序のベースは共通ではないかという仮説のもと、新しいクローン病の病因の探索することにより全く新しい治療法の開発を目指した。その結果、6例の乳・幼児期発症治療抵抗性 (難治性)クローン病患者について、p40phoxを含むすべてのタイプのCGD患者を鑑別できる我々の活性酸素アッセイ法と遺伝子解析を用いて精査を行ったが、p40phox遺伝子異常によるCGD腸炎患者を発見することは出来なかった。

研究成果

• [雑誌論文] Both C1B domain and pseudosubstrate region are necessary for saturated fatty acidmembrane; distinct role of intramolecular domains for different translocation (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto, T., Kashiwagi, K., Saito, N., and Shirai, Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 432 ページ: 384-388
• [雑誌論文] Both C1B domain and pseudosubstrate region are necessary for saturated fatty acid membrane;distinct role of intramolecular domains for different (2013)
  • 著者名/発表者名: Takaaki Nishimoto, T., Kashiwagi, K., Saito, N., and Shirai, Y.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 432 号: 2 ページ: 384-388
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.01.048
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel PKCα-mediated phosphorylation site(s) on cofilin and their potential role in terminating histamine release (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K-I., Kuramasu, M., Nakamura, T., Yanagita, T., Mizuno, K., Hide, I., Nakata, Y., Saito, N.
  • 雑誌名: Mol Biol Cell 巻: 23(18) ページ: 3707-3721
• [雑誌論文] MARCKS dephosphorylation is involved in bradykinin-induced neurite outgrowth in neuroblastoma SH-SY5Y cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanabe A, Shiraishi M, Negishi M, Saito N, Tanabe M, and Sasaki Y
  • 雑誌名: J Cell Physiol 巻: 227(2) ページ: 618-629
• [雑誌論文] Establishment of a Novel Fluorescence-Based Method to Evaluate Chaperone-Mediated Autophagy in a Single Neuron. (2012)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Ken-ich Yoshino, K., Tanaka, S., Dohi, E., Onji, T., Yamamoto, K., Hide, I., Paulson, H.L., Saito, N., Sakai, N
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7(2)
• [雑誌論文] c-Abl tyrosine kinase regulates serum-induced nuclear export of diacylglycerol kinase αby phosphorylation at Tyr218 (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsubara, T., Ikeda, M., Kiso, Y., Sakuma, M., Yoshino, K-I., Sakane, F., Merida, I., Saito, N. and Shirai, Y
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 287 ページ: 5507-5517
• [雑誌論文] Novel PKCalphamediated phosphorylation site(s) on cofilin and their potential role in (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K^I., Kuramasu,M., Nakamura, T., Yanagita, T., Mizuno, K.,Hide, I., Nakata, Y., Saito, N.
  • 雑誌名: Mol Biol. Cell 巻: 23 ページ: 3707-3721
  • 査読あり
• [雑誌論文] MARCKS dephosphorylation is involved in bradykinin-induced neurite outgrowth in neuroblastoma SH-SY5Y cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tanabe A, Shiraishi M, Negishi M, Saito N, Tanabe M, and Sasaki Y.
  • 雑誌名: J Cell Physiol. 巻: 227 号: 2 ページ: 618-629
  • DOI: 10.1002/jcp.22763
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a Novel Fluorescence-Based Method to Evaluate Chaperone-Mediated Autophagy in a Single Neuron. (2012)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Yoshino, K., Tanaka, S., Dohi, E., Onji, T., Yamamoto, K., Hide, I., Paulson, H.L., Saito, N., Sakai, N
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cooperation of p40phox with p47phox for Nox2 activation during FcγR-mediated phagocytosis --Mechanism for acquisition of p40phox PI(3)P binding-- (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueyama, T., Nakakita, J., Kobayashi, T., Kobayashi, T., Son, J-h., Sakaguchi, H., Leto, T., and Saito, N
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 286 ページ: 40693-40705
• [雑誌論文] Molecular pathophysiology of neurodegenerative disease caused by γPKC mutations (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakai, N., Saito, N. and Seki, T
  • 雑誌名: World J. Biological Psychiatry 巻: 12(S1) ページ: 95-98
• [雑誌論文] Elucidation of the Molecular Mechanism and Exploration of Novel Therapeutics for Spinocerebellar Ataxia Caused by Mutant Protein Kinase Cγ (2011)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Adachi, N., Abe-Seki, N., Shimahara, T., Takahashi, H., Yamamoto, K., Saito, N. and Sakai, N
  • 雑誌名: J Pharmacol Sci 巻: 116 ページ: 239-247
  • NAID: 10029894921
• [雑誌論文] Streptococcus mutans diacylglycerol kinase homologue:a potential target for anti-caries chemotherapy (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata, Y., Kawada-Matsuo, M., Shirai, Y., Saito, N.,Li. D., and Yamashita, Y
  • 雑誌名: J. Med. Microbiol 巻: 60 ページ: 625-630
• [雑誌論文] Direct binding of RalA to PKCη and its crucial role in morphological change during keratinocytes differentiation (2011)
  • 著者名/発表者名: Shirai, Y., Morioka, S., Sakuma, M., Yoshino, K., Otsuji, C., Sakai, N., Kashiwagi, K., Chida, K., Shirakawa, R., Horiuchi, H., Nishigori, C., Ueyama, T., Saito, N
  • 雑誌名: Mol. Biol. Cell 巻: 22 ページ: 1340-1352
• [雑誌論文] Nuclear Choline Acetyltransferase Activates Transcription of a High-affinity Choline Transporter (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuo, A., Bellier, J-P, Nishimura, M., Yasuhara, O., Saito, N. and Kimura, H
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 286 ページ: 5836-5845
• [雑誌論文] Establishment of a novel fluorescence-based method to evaluate chaperone-mediate autophagy in a singlz neuron (2011)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Ki Y., Tanaka, S., Dohi, E., Onji, T., Yamamoto, K., Seki T, Yoshino KI, Tanaka S, Dohi E, Onji T, Yamamoto K, Hide, I., Sakai, N. et al.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7 号: 2 ページ: e31232-e31232
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0031232
  • 査読あり
• [雑誌論文] c-Abl tyrosine kinase regulates serum-induced nuclear export of diacylglycerol kinase α by phosphorylation at Tyr218 (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsubara, M., Ikeda, M., Kiso, Y., Sakuma, M., Sakane, F., Merida, I, Saito, N., Shirai, Y.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem 巻: 287 号: 8 ページ: 5507-5517
  • DOI: 10.1074/jbc.m111.296897
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cooperation of p40phox with p47phox for Nox2 activation during Fc{lower case gamma}R-mediated phagocytosis --Mechanism for acquisition of p40phox PI(3)P binding--" (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueyama, T., Nakakita, J., Kobayashi, T., Kobayashi, T., -hyun Son, J-h., Sakaguchi, H., Leto, T., and Saito, N
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 286 ページ: 40693-40705
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular pathophysiology of neurodegenerative disease caused by PKC mutations. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakai, N., Saito, N. and Seki, T.
  • 雑誌名: World J. Biological Psychiatry 巻: 12 ページ: 95-98
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elucidation of the Molecular Mechanism and Exploration of Novel Therapeutics for Spinocerebellar Ataxia Caused by Mutant Protein Kinase Cγ. (2011)
  • 著者名/発表者名: Seki, T., Adachi, N., Abe-Seki, N., Shimahara, T., Takahashi, H., Yamamoto, K., Saito, N. and Sakai, N．
  • 雑誌名: J Pharmacol Sci 巻: 116 ページ: 239-247
  • NAID: 10029894921
  • 査読あり
• [雑誌論文] Streptococcus mutans diacylglycerol kinase homologue:a potential target for anti-caries chemotherapy. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata, Y., Kawada-Matsuo, M., Shirai, Y., Saito, N., Li. D., and Yamashita, Y.
  • 雑誌名: J. Med. Microbiol. 巻: 60 ページ: 625-630
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct binding of RalA to PKC and its crucial role in morphological change during keratinocytes differentiation. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shirai, Y., Morioka, S., Sakuma, M., Yoshino, K., Otsuji, C., Sakai, N., Kashiwagi, K., Chida, K., Shirakawa, R., Horiuchi, H., Nishigori, C., Ueyama, T., Saito, N.
  • 雑誌名: Mol. Biol. Cell 巻: 22 ページ: 1340-1352
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nuclear Choline Acetyltransferase Activates Transcription of a High-affinity Choline Transporter. (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuo, A., Bellier, J-P, Nishimura, M., Yasuhara, O., Saito, N. and Kimura, H.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 286 ページ: 5836-5845
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased seizure susceptibility in a mouse with diacylglycerol kinase β2 deficiency
  • 著者名/発表者名: Ishisaka, M., Tsuruma, K., Shimazawa, M., Shirai, Y.,Saito, N., and Hara, H
  • 雑誌名: Neuroscience & Medicine
• [学会発表] 黒質線条体系における PKCγの基質の解析:ドパミン遊離におけるβPIX リン酸化の 役割 (2013)
  • 著者名/発表者名: 白藤 俊彦、上山健彦、吉野健一、足立直子、高橋英之、吾郷由希夫、松田敏夫、齋藤 尚亮
  • 学会等名: 第86回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 福岡(口頭発表・日本語)
• [学会発表] Duox の活性酸素産生機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐久間 恵、上山健彦、ヒン田 猛、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第86回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 福岡(口頭発表・日本語)
• [学会発表] Duoxの活性酸素産生機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐久間 恵、上山 健彦、濵田 猛、齋藤 尚亮
  • 学会等名: 第86回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 黒質線条体系における PKCγの基質の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 白藤 俊彦、吉野 健一、足立 直子、高橋 英之、香田 健、梨子田 哲明、吾郷 由希夫、松田 敏夫、齋藤 尚亮
  • 学会等名: 第121回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 徳島(口頭発表・日本語)
  • 年月日: 2012-06-29
• [学会発表] Glial functions of Rho-family small GTPases during cerebellar development and after CNS injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueyama,T., Kondoh T., Kohta M., Kohmura,E., Hayashibe,M., Nakamura,T., Sakahara,M., Kassai,H., Nakao,K., Aiba,A. and Saito,N.
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都(ポスター・英語)
• [学会発表] Involvment of PKCgamma in neurodegenerative disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, N., Takahashi, H., Shirafuji, T., Adachi, N., Danno, S., Ueyama, T., Seki, T. and Sakai,N
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都(ポスター・英語)
• [学会発表] Role of PKCα-mediated cofilin phosphorylation in the degranulation from RBL-2H3 mast cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K., Kuramasu, M., Nakamura, T., Mizuno, K., Hide,I., Nakata,Y.and Saito,N
  • 学会等名: 22th IUBMB & 37th FEBS
  • 発表場所: スペイン(ポスター発表・英語)
• [学会発表] DGKbeta による神経突起伸張機構の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 加野 拓也、上田 修司、山之上 稔、齋藤尚亮、白井 康仁
  • 学会等名: 第85回日本生化学会
  • 発表場所: 福岡(ポスター発表・日本語)
• [学会発表] 中枢神経損傷とRho family GTPases (CNS injury and Rho family GTPases) (2012)
  • 著者名/発表者名: 上山健彦、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都(口頭発表、英語)
• [学会発表] 創薬ターゲットとしてのジアシルグリセロールキナーゼ (2012)
  • 著者名/発表者名: 白井康仁、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都(口頭発表、英語)
• [学会発表] ジアシルグリセロールキナーゼのヒスタミン分泌制御における役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐久間 恵、白井康仁、上山健彦、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都(ポスター発表、日本語)
• [学会発表] 無血清時における核内 DGKalpha の生理機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 木曽裕子、白井康仁、佐久間 恵、池田もも、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都(ポスター発表、日本語)
• [学会発表] 細胞内シグナル分子の可視化と細胞機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 齋藤尚亮
  • 学会等名: 第89回日本生理学大会
  • 発表場所: 松本(招待講演・日本語)
• [学会発表] Glial functions of Rho-family small GTPases during cerebellar development and after CNS injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueyama,T., Kondoh T., Kohta M., Kohmura,E., Hayashibe,M., Nakamura,T.,
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Involvment of PKCgamma in neurodegenerative disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, N., Takahashi, H., Shirafuji, T., Adachi, N., Danno, S., Ueyama, T.,
  • 学会等名: 14th International congress of histochemistry and cytochemistry
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] le of PKCalpha-mediated cofilin phosphorylation in the degranulation from RBL-2H3 mast cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino, K., Kuramasu, M., Nakamura, T., Mizuno, K.,
  • 学会等名: 22th IUBMB & 37th FEBS
  • 発表場所: スペイン
• [学会発表] プロテインキナーゼCのトランスロケーションと酵素活性に対するプロポフェノールの効果 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮原岳史、関 貴弘、秀 和泉、田中 茂、齋藤尚亮、入船正浩、酒井規雄
  • 学会等名: 第120回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 京都(ポスター発表・日本語)
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] 異なるチロシンリン酸化によるジアシルグリセロールキナーゼ alpha の局在 調節機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 白井康仁、池田もも、佐久間 恵、木曽裕子、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第119回日本薬理学会近畿部会
  • 発表場所: 名古屋(口頭発表・日本語)
  • 年月日: 2011-07-08
• [学会発表] Nuclear choline acetyltransferase activates transcription of a high-affinity choline transporter (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuo,A., J.P.Bellier., Nishimura,M., Yasuhara,O., Saito,N. and Kimura,H
  • 学会等名: 8th IBRO worrd congress of neuroscience
  • 発表場所: Italy(ポスター発表・英語)
• [学会発表] Novel phosphorylation site(s) of cofilin by PKCalpha contributes to proper termination of histamine release (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐久間 恵、白井康仁、吉野健一、倉増真帆、中村朋文、水野健作、秀 和泉、仲田義啓、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第84回日本生化学会
  • 発表場所: 京都(口頭発表、日本語)
• [学会発表] 部位特異的KOマウスを用いた低分子量Gタンパク質の組織学的機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 上山健彦、齋藤尚亮
  • 学会等名: 日本組織細胞化学会年会
  • 発表場所: 金沢(招待講演、日本語)
• [学会発表] Novel phosphorylation site(s) of cofilin by PKCα and its negative role in the degranulation from RBL-2H3 mast cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakuma,M., Shirai,Y., Yoshino K., Kuramasu,M., Nakamura,T., Mizuno,K., Hide,I., Nakata,Y. and Saito,N
  • 学会等名: he American society for cell biology
  • 発表場所: デンバー(ポスター発表・英語)
• [学会発表] Novel phosphorylation site(s) of cofilin by PKCalpha and its negative role in the degranulation from RBL-2H3 mast cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakuma,M., Shirai,Y., Yoshino K., Kuramasu, M., Nakamura,T., Mizuno,K., Hide,I., Nakata,Y. and Saito,N.
  • 学会等名: The American society for cell biology.
  • 発表場所: Denver, USA
• [学会発表] 中枢神経損傷とRho family GTPases
  • 著者名/発表者名: 上山健彦、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 創薬ターゲットとしてのジアシルグリセロールキナーゼ
  • 著者名/発表者名: 白井康仁、齋藤尚亮
  • 学会等名: 第85回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 細胞内シグナルの可視化と細胞機能
  • 著者名/発表者名: 齋藤尚亮
  • 学会等名: 第８９日本生理学会大会
  • 発表場所: 松本