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GPCRを対象とした無細胞発現プロテオリポソームを用いた機能性抗体検出技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 24710251
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 生物分子科学
研究機関愛媛大学

研究代表者

竹田 浩之  愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 助教 (40609393)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2012年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
キーワード膜タンパク質 / 無細胞タンパク質合成 / プロテオリポソーム / GPCR / モノクローナル抗体 / スクリーニング / AlphaScreen / 抗体 / DRD1
研究概要

リポソーム添加コムギ無細胞タンパク質合成技術を用いて合成したGPCRプロテオリポソームを基盤として、AlphaScreen、ELISA、Biacoreによる膜タンパク質抗原と抗体間の相互作用解析技術を開発した。AlphaScreenとELISAはスループットが高く抗体一次選抜に適しているが、特にAlphaScreenは構造認識抗体の検出率に優れていた。本研究で開発した手法を用いてDRD1抗体の選抜および性状解析を行なった。その結果、無細胞合成プロテオリポソームを用いた免疫および抗体選抜手法は、これまで困難であった抗膜タンパク質抗体開発を加速させるに十分なポテンシャルをもつことを示している。

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (2件) 学会発表 (12件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] 無細胞タンパク質アレイを用いたプロテインキナーゼおよびユビキチンリガーゼの基質タンパク質探索技術2013

    • 著者名/発表者名
      澤崎達也、竹田浩之、高橋宏隆、根本圭一郎
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 85 ページ: 438-446

    • NAID

      10031184264

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [雑誌論文] 無細胞タンパク質アレイを用いたプロテインキナーゼおよびユビキチンリガーゼの基質タンパク質探索技術

    • 著者名/発表者名
      澤崎達也, 竹田浩之, 高橋宏隆, 根本圭一郎
    • 雑誌名

      生化学

      巻: 85 ページ: 438-446

    • NAID

      10031184264

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Synthesis of GPCR by Wheat Cell-free Protein Synthesis System, Which is Suitable for Biochemical Analysis and Monoclonal Antibody Production2014

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Tatsuhiko Ozawa, Atsushi Muraguchi, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      Keystone Symposia : G Protein-Coupled Receptors - Structural Dynamics and Functional Implications
    • 発表場所
      Snowbird, Utah, United States
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Synthesis of GPCR by Wheat Cell-free Protein Synthesis System, Which is Suitable for Biochemical Analysis and Monoclonal Antibody Production2014

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Tatsuhiko Ozawa, Atsushi Muraguchi, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      Keystone Symposia: G Protein-Coupled Receptors - Structural Dynamics and Functional Implications
    • 発表場所
      Snowbird, Utah, United States
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] リポソーム添加コムギ無細胞系によるGPCRの発現と抗GPCRモノクローナル抗体作製2013

    • 著者名/発表者名
      竹田浩之, 小笠原富夫, 小澤龍彦, 村口篤, 澤崎達也
    • 学会等名
      第8回無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2013-10-21
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] リポソーム添加コムギ無細胞タンパク質合成系を用いた膜タンパク質の汎用的合成法とそのアプリケーション2013

    • 著者名/発表者名
      竹田浩之
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会主催プロテオサイエンスセンター・JHUPOサテライトジョイントシンポジウム
    • 発表場所
      松山
    • 年月日
      2013-06-07
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Synthesis of GPCR by Wheat Cell-free Protein Synthesis System, Which is Suitable for Biochemical Analysis and Monoclonal Antibody Production2013

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Tatsuhiko Ozawa, Atsushi Muraguchi, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      GPCR workshop 2013
    • 発表場所
      Maui, Hawaii, United States
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書 2013 研究成果報告書
  • [学会発表] リポソーム添加コムギ無細胞系によるGPCRの発現と抗GPCRモノクローナル抗体作製2013

    • 著者名/発表者名
      竹田 浩之、小笠原 富夫、小澤龍彦、村口 篤、澤崎 達也
    • 学会等名
      第8回 無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      新潟
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Membrane protein synthesis by wheat cell-free system with liposome2012

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Kenta Kohara, Kiyotaka Hiraga, Yukiko Washino, Takahiro Iwasaki, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      Protein Island Matsuyama 2012
    • 発表場所
      松山
    • 年月日
      2012-09-25
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Synthesis of GPCR by Wheat Cell-free Protein Synthesis System; Application for Functional Analysis and Monoclonal Antibody Production2012

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Mamoru Takahashi, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      IBC 23rd Annual International Conference Antibody Engineering & Therapeutics
    • 発表場所
      San Diego, CA, USA
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Synthesis of GPCR by Wheat Cell-free Protein Synthesis System; Application for Functional Analysis and Monoclonal Antibody Production2012

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Takeda, Tomio Ogasawara, Mamoru Takahashi, Yaeta Endo, Tatsuya Sawasaki
    • 学会等名
      The 4th Membrane Protein Technologies Meeting
    • 発表場所
      San Francisco, CA, USA
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書 2012 実施状況報告書
  • [学会発表] ポソーム添加コムギ無細胞系によるGPCRの発現と抗GPCRモノクローナル抗体作製2012

    • 著者名/発表者名
      竹田浩之, 小笠原富夫, 平賀清貴, 遠藤弥重太, 澤崎達也
    • 学会等名
      第7回無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      松山
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] リポソーム添加コムギ無細胞系によるGPCRの発現と抗GPCRモノクローナル抗体作製2012

    • 著者名/発表者名
      竹田 浩之、小笠原 富夫、平賀 清貴、遠藤 弥重太、澤崎 達也
    • 学会等名
      第7回 無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      松山
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] リポソーム添加コムギ無細胞タンパク質合成系を用いた膜タンパク質の汎用的合成法とそのアプリケーション

    • 著者名/発表者名
      竹田浩之
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会主催 プロテオサイエンスセンター・JHUPOサテライトジョイントシンポジウム
    • 発表場所
      松山
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [備考] 澤崎研究室ホームページ

    • URL

      http://www.ehime-u.ac.jp/~cellfree/sawasakilab/

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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