• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

ゲノム編集を利用した遺伝子ノックイン新技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 26290070
研究種目

基盤研究(B)

配分区分一部基金
応募区分一般
研究分野 システムゲノム科学
研究機関広島大学

研究代表者

山本 卓  広島大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (90244102)

研究分担者 谷口 俊介  筑波大学, 生命環境科学研究科(系), 准教授 (00505331)
連携研究者 相田 知海  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 准教授 (50540481)
坂本 尚昭  広島大学, 大学院理学研究科, 准教授 (00332338)
鈴木 賢一  広島大学, 大学院理学研究科, 特任准教授 (90363043)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
17,680千円 (直接経費: 13,600千円、間接経費: 4,080千円)
2016年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2015年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2014年度: 9,360千円 (直接経費: 7,200千円、間接経費: 2,160千円)
キーワードバイオテクノロジー / ゲノム編集
研究成果の概要

本研究では、マイクロホモロジー媒介性末端結合(MMEJ)による新規の遺伝子ノックイン法であるPITCh法を確立した。PITCh法を用いて培養細胞および動物個体(カエルおよびマウス)へのレポーター遺伝子のノックインを行った結果、HR経路に比較して高効率でのノックインを確認し、さらに正確にノックインされていることをシーケンス解析によって確認した。さらに、MMEJを促進する因子を培養細胞を用いてスクリーニングし、Exonuclease I(ExoI)によってPITCh法によるノックインの効率上昇が確認された。さらに、マウスにおけるPITCh法によるノックインにおいてもExoIの効果が確認された。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて 2017 2016 2015 2014 その他

すべて 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 3件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 6件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (8件) (うち招待講演 7件) 図書 (1件) 備考 (4件)

  • [雑誌論文] Gene cassette knock-in in mammalian cells and zygotes by enhanced MMEJ.2016

    • 著者名/発表者名
      Aida T, Nakade S, Sakuma T, Izu Y, Oishi A, Mochida K, Ishikubo H, Usami T, Aizawa H, Yamamoto T, Tanaka K.
    • 雑誌名

      BMC Genomics

      巻: 17 号: 1 ページ: 979-979

    • DOI

      10.1186/s12864-016-3331-9

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Ultra-superovulation for the CRISPR-Cas9-mediated production of gene-knockout, single- amino-acid-substituted, and floxed mice2016

    • 著者名/発表者名
      Yoshiko Nakagawa, Tetsushi Sakuma, Norihisa Nishimichi, Yasuyuki Yokosaki, Noriyuki Yanaka, Toru Takeo, Naomi Nakagata and Takashi Yamamoto
    • 雑誌名

      Biology Open

      巻: 5 号: 8 ページ: 1142-1148

    • DOI

      10.1242/bio.019349

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Rapid and efficient analysis of gene function using CRISPR-Cas9 in Xenopus tropicalis founders2016

    • 著者名/発表者名
      Shigeta, Mitsuki; Sakane, Yuto; Iida, Midori; Suzuki, Miyuki; Kashiwagi, Keiko; Kashiwagi, Akihiko; Fujii, Satoshi; Yamamoto, Takashi; Suzuki, Ken-ichi
    • 雑誌名

      Genes to Cells

      巻: in press 号: 7 ページ: 755-771

    • DOI

      10.1111/gtc.12379

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] MMEJ-assisted gene knock-in using TALENs and CRISPR-Cas9 with the PITCH systems.2016

    • 著者名/発表者名
      Sakuma T, Nakade S, Sakane Y, Suzuki K, Yamamoto T.
    • 雑誌名

      Nature Protocols

      巻: 11 号: 1 ページ: 118-113

    • DOI

      10.1038/nprot.2015.140

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] The Expression of TALEN before Fertilization Provides a Rapid Knock-Out Phenotype in Xenopus laevis Founder Embryos.2015

    • 著者名/発表者名
      Miyamoto K, Suzuki K, Suzuki M, Sakane Y, Sakuma T, Herberg S, Simeone A, Simpson D, Jullien J, Yamamoto T, Gurdon JB.
    • 雑誌名

      PLOS ONE

      巻: 10(11) 号: 11 ページ: e0142946-e0142946

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0142946

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Homologous recombination-independent large gene cassette knock-in in CHO cells using TALEN and MMEJ-directed donor plasmids.2015

    • 著者名/発表者名
      Sakuma, T., Takenaga, M., Kawabe, Y., Nakamura, T., Kamihira, M. & Yamamoto, T.
    • 雑誌名

      Int. J. Mol. Sci.

      巻: 16 号: 10 ページ: 23849-23866

    • DOI

      10.3390/ijms161023849

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Microhomology-mediated end-joining-dependent integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas92014

    • 著者名/発表者名
      S. Nakade, T. Tsubota, Y. Sakane, S. Kume, N. Sakamoto, M. Obara, T. Daimon, H. Sezutsu, T. Yamamoto, T. Sakuma and K. T. Suzuki
    • 雑誌名

      Nat Commun

      巻: 5 号: 1 ページ: 5560-5560

    • DOI

      10.1038/ncomms6560

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] ゲノム編集技術の基本原理 と医学研究での利用2017

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      第16回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      仙台
    • 年月日
      2017-03-07
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ゲノム編集の基本原理と医学分野での利用2016

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      第31回 日本整形外科学会基礎学術集会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2016-10-10
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ゲノム編集の基本原理と最近の研究動向2016

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      日本学術会議公開学術講演会「ゲノム編集技術の技術と将来展望」
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2016-08-19
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ゲノム編集の基本原理と研究動向2016

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      JBAセミナー「ゲノム編集技術の最近の動向と規制・特許について」
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2016-03-17
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ゲノム編集の基本原理と医学分野での可能性2015

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      日本人類遺伝学会第60回大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-10-16
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ゲノム編集が生命科学に革命を起こす2015

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 学会等名
      読売テクノフォーラム
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-06-22
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] MMEJ-mediated integration of donor DNA in cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas92015

    • 著者名/発表者名
      Nakade S, Tsubota T, Sakane Y, Kume S, Sakamoto N, Obara M, Daimon T, Sezutsu H, Yamamoto T, Sakuma T and Suzuki KI
    • 学会等名
      Keystone Sympsia
    • 発表場所
      Big Sky, MT, USA
    • 年月日
      2015-01-11 – 2015-01-16
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Genome editing in cultured cells and animals using TALENs and CRISPR/Cas2014

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto T
    • 学会等名
      The 3rd “International Institute for Advanced Studies” Conference of Novel Developments on the Study of Life and Biological Systems Based on Genome Engineering and Imaging Science
    • 発表場所
      木津川市
    • 年月日
      2014-10-28 – 2014-10-29
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 招待講演
  • [図書] ゲノム編集入門2016

    • 著者名/発表者名
      山本 卓
    • 総ページ数
      20
    • 出版者
      裳華房
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [備考] 広島大学大学院理学研究科分子遺伝学研究室

    • URL

      http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/index.html

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [備考] 広島大学分子遺伝学研究室

    • URL

      http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/index.html

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [備考] 分子遺伝学研究室

    • URL

      http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/index.html

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] ゲノム編集コンソーシアム

    • URL

      http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/genome_editing/index.html

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

URL: 

公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi