BirA酵素標識法による運動時のHSPBsの標的分子の網羅的解析とその応用

• 研究課題/領域番号: 26350889
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用健康科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 上田 修司 神戸大学, 農学研究科, 助教 (50379400)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2016年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: ヒートショック蛋白質 / RhoA / 運動 / 筋肉 / BirA / 国際情報交換 / BioID

研究成果の概要

本研究では、BirA酵素標識法による低分子量ヒートショック蛋白質 HSPB1の結合蛋白質の網羅的な解析に成功することができた。また、IGF-IによるC2C12筋細胞株の肥大化モデルにおいて、RhoA-SLKのシグナルの関与を明らかにした。今後、BirA酵素標識法による分子シャペロンの活性化を定量的に測定する実験法に発展させると共に、高齢者の筋萎縮の予防に繋がる食品成分の開発に用いる研究ツールとして応用する計画である。

研究成果

• [国際共同研究] University of California Davis(米国)
• [国際共同研究] University of Ottawa(Canada)
• [国際共同研究] University of California Davis(米国)
• [雑誌論文] Force dependent biotinylation of myosin IIA by α-catenin tagged with a Promiscuous Biotin Ligase. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Blee AM, Macway KG, Renner DJ, Yamada S
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 25;10 号: 3 ページ: e0122886-e0122886
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0122886
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Chicken heat shock protein HSPB1 increases and interacts with B-crystallin in aged skeletal muscle (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda S、Kokaji Y、Simizu S、Honda K、Yoshino K、Kamisoyama Y、Shirai Y、Yamanoue Y
  • 雑誌名: Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 巻: 79 号: 11 ページ: 1867-1875
  • DOI: 10.1080/09168451.2015.1061419
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Force Dependent Biotinylation of Myosin IIA by α-Catenin Tagged with a Promiscuous Biotin Ligase (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Blee AM, Macway KG, Renner DJ, Yamada S.
  • 雑誌名: PLOSone 巻: 25 ページ: 0122886-0122886
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 筋肉の増加減退に関わるRhoAの機能解析と相互作用分子の探索 (2016)
  • 著者名/発表者名: 櫛谷 晃帆，上田 修司，加藤 良毅，桐村 悠佑，石政 碧， 吉野 健一，竹内 敦子，山之上 稔，白井 康仁
  • 学会等名: 第63回日本生化学会近畿支部例会
  • 発表場所: 神戸薬科大学 (兵庫県神戸市)
• [学会発表] 骨格筋におけるHSPB1結合蛋白質の探索とそのアクトミオシンのATPase活性に与える影響 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小鍛冶 泰斗，加藤 良毅，櫛谷 晃帆，吉野 健一，竹内 敦子，山之上 稔，白井 康仁，上田 修司
  • 学会等名: 日本農芸化学会平成28年度関西支部大会
  • 発表場所: 滋賀県立大学 (滋賀県彦根市)
• [学会発表] BioID法を用いた低分子量Ｇ蛋白質RhoAの結合蛋白質の探索 (2016)
  • 著者名/発表者名: 櫛谷 晃帆，上田 修司，加藤 良毅，吉野 健一，竹内 敦子，山之上 稔，白井 康仁
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ橫浜 (神奈川県横浜市)
• [学会発表] Identification of novel RhoA binding proteins by using BioID system. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kushiya A, Kato Y, Yamada S, Yoshino K, Takeuchi A, Yamanoue M, Shirai Y, Ueda S.
  • 学会等名: The American Society for Cell Biology 2016 ASCB/IFCB Meeting
  • 発表場所: Moscone Center San Francisco, CA. USA
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of novel HSPB1 binding proteins in skeletal muscle (2016)
  • 著者名/発表者名: Kushiya A, Kato Y, Yamada S, Yoshino K, Takeuchi A, Yamanoue M, Shirai Y, Ueda S
  • 学会等名: The American Society for Cell Biology 2016 ASCB/IFCB Meeting
  • 発表場所: Moscone Center San Francisco, CA. USA
  • 国際学会
• [学会発表] Force Dependent Biotinylation of Myosin IIA by α-Catenin Tagged with a Promiscuous Biotin Ligase. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Blee AM, Macway KG, Renner DJ, Yamada S
  • 学会等名: The American Society for Cell Biology 2015 ASCB/IFCB Meeting
  • 発表場所: San Diego CA. USA
  • 年月日: 2015-12-12
  • 国際学会
• [学会発表] Expression analysis of diacylglycerol kinase theta in mouse tissues by immunostaining and LacZ reporter assay (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Koizumi N, Yamanoue M, Ikawa M, Shirai Y
  • 学会等名: 第88回日本薬理学会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場
  • 年月日: 2015-03-18 – 2015-03-20
• [学会発表] A role of RhoA activation in IGF-I-induced muscular hypertrophy model (2014)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Yamada S, Kirimura Y, Kushiya A, Yamanoue Y, Satoh T, Sirai Y i.
  • 学会等名: The American Society for Cell Biology ASCB/IFCB Meeting
  • 発表場所: Philadelphia, USA
  • 年月日: 2014-12-06 – 2014-12-10
• [学会発表] Identification of novel binding proteins of small molecular heat shock protein HSPB1 (2014)
  • 著者名/発表者名: Kokaji Y, Ueda S, Yoshino K, Yamanoue M, Shirai Y.
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] Expression of diacylglycerol kinase theta during the organogenesis of mouse embryos (2014)
  • 著者名/発表者名: Ueda S, Tu-Sekine B, Yamanoue M, Raben DM, Shirai Y
  • 学会等名: LIPID MAPS Annual Meeting
  • 発表場所: La Jolla, CA
  • 年月日: 2014-05-13 – 2014-05-14
• [図書] 独立行政法人農畜産業振興機構 H27年度国産食肉等新需要創出緊急対策事業報告書 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高齢者の健康維持機能に関わる動物性食品由来の新規機能性成分の探索に関する研究報告
  • 総ページ数: 58
  • 出版者: 全国食肉事業協同組合連合会