発癌物質によるDNA損傷と突然変異誘起の機序

Research Project

Project/Area Number	01015058
Research Category	Grant-in-Aid for Cancer Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	品川日出夫大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (40029799)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	雨村光子大阪大学, 微生物病研究所, 教務職員 (80159467) 牧野耕三大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (20181620)
Project Period (FY)	1989
Project Status	Completed (Fiscal Year 1989)
Budget Amount *help	¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000) Fiscal Year 1989: ¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Keywords	DNA損傷 / 突然変異 / 放射線 / 発癌 / recA / umuDC遺伝子 / ruvAB遺伝子
Research Abstract	放射線や発癌物質によるDNA損傷の修復と突然変異の誘起に関与する遺伝子umuD、CおよびruvA、Bの機能を研究して、以下の成果を得た。 1.ruvBはDNAの組換え修復に関与していることがしられていたが、それとオペロンを形成しているruvAもDNA修復に関与していることを証明した。 2,X線照射によって、umuD、C依存性と、ruvA、B依存性2種類のpremutagenic lesionができることを証明した。 3.大腸菌でRuvBタンパクの多量生産株を作成し、精製した。RuvBはATPとADPに結合する性質をもち、弱いATP分解活性をしめした。同様にRuvAタンパクも精製し、RuvAは単鎖および二重鎖DNAと結合する性質があることを明らかにした。DNAと結合したRuvAはRuvBのもつATPase活性を促進することを証明した。 4.細胞がDNAに損傷を受けると、RecAタンパクが活性化されて、UmuDおよびMucAタンパクのproteolytic processingを促進して、突然変異誘起の反応に関与する活性型に変えることを証明した。 5.T7ファージの系を利用して、UmuDとUmuCタンパクおよびこれらのアナログであるMucAとMucBタンパクを大腸菌で多量生産することに成功した。UmuDおよびMucAタンパクを精製することができた。現在UmuCとMucBタンパクの精製を試みている。