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in vitro ^<31>PーNMR分光法を用いた腫瘍細胞株のリン代謝の観察

Research Project

Project/Area Number 01570830
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Orthopaedic surgery
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

小島 達自  東京大学, 医学部・(病)整形外科, 助手 (30161912)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 伊藤 正光  東京大学, 医学部・放射線基礎医学, 助手 (80176362)
檜垣 昇三  東京大学, 医学部(病)整形外科, 講師
Project Period (FY) 1989 – 1991
Project Status Completed (Fiscal Year 1991)
Budget Amount *help
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1991: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 1990: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 1989: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywords骨軟部腫瘍 / 骨肉腫 / 培養株 / ^<31>PーMIRS / in vitro / リン代謝 / 化学療法 / 抗癌剤 / 培養細胞 / ^<31>PーMRS / inーvitro / ^<31>P-MRS
Research Abstract

〔材料と方法〕細胞は日本癌細胞・遺伝子銀行(JCRB)のヒト骨肉腫株ltuーO3N1を使用した。大量培養した細胞をラバ-ポリスマンで剥離回収し、日本精密科学製のパイレックスNMR試料管(外径8mm、内径7mm、長さ18cm)内に30分自然沈降させ深さ1.5〜2cmになるように(総細胞数5〜8×10^8個)調整した。更にこの試料管を外径10mm内径9mmの重水を入れた試料管内に重ね挿入した。滅菌したテフロン細管3本を内試料管に入れ、うち最長の1本は細胞に接し培養液注入用とした。灌流用培養液は10%ウシ胎児血清加DM170を用いた。細胞層の上2cmに石英綿フィルタ-をつめ中間長のテフロン細管は液体及び気体回収用、最短の1本からは5%CO_2加O_2を注入し、細胞に接する培養液を灌流しながら ^<31>P=MRSを測定した。NMR装置はVarian400を使用、細胞は37℃に保ち、リンスペクトル周波数161、903MH_2,プロトンデカップリング、受信時間0.4秒、遅延時間0.6秒、の条件で5000〜6000回加算した。
〔結果〕クレアチンリン酸PCrのスペクトルは筋組織のそれに比べ極小さい。γー,αー,βーNTPの信号も弱い。無機リン酸P_2の信号は最も強かった。更にアントラサイクリン系の抗癌剤であるピラルービシン(THP)10μg/mlを溶解した培養液で灌流するとスペクトルピ-ク比の変化率はPi/pcrでは-10.6%,PME/pーNTPが+15.6%、Pi/γーNTPが-44.5%、Pi/αーNTPが-43.5%、Pi/βーNTPが-12.5%であった。
〔考察〕今までin vivoの骨肉腫の化学療法の各リンスペクトルの変化率はプラス側であったが、今回のin vitroの実験系ではマイナス側となった。その原因としては培養細胞の活性度、細胞だけの組織をまわりに結合織を持った。骨肉腫とのちがい、灌流条件の変化などが考えられる。

Report

(3 results)
  • 1991 Annual Research Report
  • 1990 Annual Research Report
  • 1989 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All Other

All Publications (8 results)

  • [Publications] Itoh,M.;Yoshikawa,K.;Higaki,S.;Kojima,T.;Yagi,K.;Suzuki N.;Iio,M.: "Response of Bone and Sofit Tissae Sarcemas to Preoperative Chemotherapy monitoreol by Pー31NMR Spectroscopy" Jpn J Nuclea Medicine.

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] 伊藤 正光: "NMR分光法による腫瘍の放射線治療効果の評価に関する研究" 平成元年度科学研究費補助研究成果報告書NO.63570486.

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] 小島 達自,飯島 卓夫,檜垣 昇三,伊藤 正光,吉川 宏起: "MRSとMRIによる骨肉腫術前化学療法の効果判定" 日本整形外科学会誌(J.Jpn Crthqp Assoc). 65(6). 5683-5684 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Itoh,M.Yoshikawa,K.Higaki,S.Kojima,T.Yagi,K.Suzuki,N and Iio,M.: "Response of Bone and Soft Tissue Sarcomas to Preoperative Chemotherapy Monitored by Pー31・NMR Spectroscopy" Jpn J Nucleara Medicine.

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 伊藤 正光: "NMR分光法による腫瘍の放射線治療効果の評価に関する研究" 平成元年度科学研究費補助金研究成果報告書 番号63570486.

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] T.Kojima,S.Higaki,T.Iijima,M.Itoh,K.Yoshikawa: " ^<31>PーNMR Spectroscopic changes in preoperative osteosarooma after chemotherapy using 4DFT method" 学会発表Soie^^´te^^´ Internatioal de Chirurgie Orthope^^´dique et de Traumatologie 9ー14Sept.1990#568.

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] Itoh,M.Yoshikawa,K.Higaki,S.Kojima,T.YAGI,K.Suzuki,N.,and Iio,M.: "Response of Bone and Soft Tissue Sarcomas to Pre-operatice Chemotherapy Monitored by P-31 NMR Spectroscopy" Jpn.J.Nuclear Medicine.

    • Related Report
      1989 Annual Research Report
  • [Publications] 伊藤正光: "NMR分光法による腫瘍の放射線治療効果の評価に関する研究" 平成元年度科学研究費補助金研究成果報告書番号63570486.

    • Related Report
      1989 Annual Research Report

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Published: 1989-04-01   Modified: 2016-04-21  

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