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ニューロン・グリア間認識の分子機構

Research Project

Project/Area Number 01638002
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

御子柴 克彦  大阪大学, たんぱく質研究所, 教授 (30051840)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 花岡 和則  国立精神, 神経センター・神経研, 室長 (40189577)
林 恭三  岐阜薬科大学, 薬剤学, 教授 (00029935)
畠中 寛  大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (60208519)
田中 亮  名古屋市立大学, 医学部, 教授 (90094383)
三木 直正  金沢大学, がん研究所・薬理部, 教授 (40094445)
Project Period (FY) 1989
Project Status Completed (Fiscal Year 1989)
Budget Amount *help
¥19,500,000 (Direct Cost: ¥19,500,000)
Fiscal Year 1989: ¥19,500,000 (Direct Cost: ¥19,500,000)
KeywordsP_<400>蛋白質 / IP_3受容体 / staggererミュータントマウス / プルキンエ細胞
Research Abstract

小脳プルキンエ細胞の棘突起が欠失しているために顆粒細胞平行線維とのシナプス連絡が出きず、しかもプルキンエ細胞のCa^<2+>スパイクがみられないstaggererミュータントマウスでは分子量25万の膜蛋白質であるP_<400>蛋白質が著減している。我々は本蛋白質に着目して研究を行なっているが、今回、本蛋白質の細胞内機能を解明することに成功したので報告する。
1.staggererミュータントマウスではCa^<2+>スパイクがみられないところからCa^<2+>が関与する情報伝達系の一部に異常があることを予測していたが、分子量、局在性などからイノシトール3リン酸(IP_3)受容体である可能性が考えられたので、その同一性について検討を行なった。マウス小脳のP_2/P_3画分を1%TritonXー100で可溶化した上清について種々のクロマトグラフィーを行なうことにより、単一蛋白質としてIP_3受容体を精製することに成功した。
2.P_<400>蛋白質に対する3種類のモノクローン抗体を用いたimmunoblot解析の結果、精製したIP_3受容体P_<400>蛋白質そのものであることを明らかにした。
3.3種類のモノクローン抗体を用いてマウス小脳のcDNAライブラリーより得られたP_<400>蛋白質のcDNAクローンの塩基配列よりアミノ酸全一次構造を始めて明らかにした。
P_<400>蛋白質はプルキンエ細胞の樹状突起の発達とともに発現が増大することからプルキンエ細胞の成長に深く関わる物質であることが予測される。今回、P_<400>蛋白質がIP_3受容体そのものであることを明らかにしたことは、神経細胞の分化、発達、さらには高次機能の発現においてCa^<2+>の関与する情報伝達系が重要な役割を果たしていることを強く示唆するものである。

Report

(1 results)
  • 1989 Annual Research Report
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All Other

All Publications (8 results)

  • [Publications] Nobuaki Maeda: "Autoradiographic visualization of a calcium channel antagonist,Iーconotoxin GVIA,binding site in the brains of normal and cerebellar mutant mice(pcd and weaver)." Brain Research. 489. 21-30 (1989)

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  • [Publications] Nobuaki Maeda: "Developmental expression and intracellular location of P400 protein characteristic of Purkinje cells in the mouse cerebellum." Developmental Biology. 133. 67-76 (1989)

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  • [Publications] Hideyuki Yamamoto: "Phosphorylation of P400 protein by cyclic AMPーdependent protein kinase and Ca/calmodulinーdependent protein kinase II." Journal of Neurochemistry. 53. 917-923 (1989)

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  • [Publications] Teiichi Furuichi: "Nucleotide sequence of cDNA encoding P400 protein in the mouse cerebellum." Nucleic Acid Research. 17. 5385-5386 (1989)

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  • [Publications] Teiichi Furuichi: "Primary structure and functional expression of the inositol 1,4,5ーtrisphosphateーbinding protein P400." Nature. 342. 32-38 (1989)

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  • [Publications] Nubuaki Maeda: "A cerebellar Purkinje cell marker P400 protein is an inositol 1,4,5ーtrisphosphate(InsP3)receptor proteinーーPurification and characterization of InsP3 receptor complex." The EMBO Journal. 9. 61-67 (1990)

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  • [Publications] Katsuhiko Mikoshiba: "Myelination and Demyelination:Implications for Multiple Sclerosis." Plenum Publ.Corporation, 12 (1989)

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  • [Publications] Katsuhiko Mikoshiba: "Myelin" The Thlford Press,New Jersey,

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Published: 1989-04-01   Modified: 2016-04-21  

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