| Project/Area Number |
01654505
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
濱田 博司 東京大学, 医学部(医), 助教授 (00208589)
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| Project Period (FY) |
1989
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1989)
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| Budget Amount *help |
¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000)
Fiscal Year 1989: ¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000)
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| Keywords | 発生 / 初期発生 / 転写調節 / 転写調節因子 |
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| Research Abstract |
転写因子を検出するための材料としては、マウス胚性腫瘍細胞(とくにP19という細胞株)を用いた。胚性腫瘍細胞は一般的に発生の初期胚細胞に相当すると考えられ、P19細胞も高度の多分化能を持ち、おそらく授精後3。5日頃の内部細胞塊に類似する。このような細胞を用いて、われわれは、まず未分化胚細胞に特異的に存在する転写因子を検索した。前もってエンハンサ-・トラップ法にて単離した未分化胚細胞特異的エンハサ-を用い、その塩基配列に結合する蛋白因子を調べた結果、新しい転写因子Oct-3を検出した。以下に現在までに明かとなったOct-3の構造と機能についてまとめた。1)結合塩基配列の特異性:Oct-3は8塩基より成るオクタマ-配列(ATTTGCAT)及びATに富む塩基配列(TTAAAATTCA)を特異的に認識する。既知の二つのオクタマ-結合性転写因子(Oct-1,Oct-2)と同様の塩基特異性を示す。2)構造:Oct-3タンパク質に対応するcDNAを未分化P19細胞よりクロ-ニングし、その一次構造を決定した。Oct-1及びOct-2とおなじく、DNA結合部位にはホメオボックスを含む典型的なPOUドメインを持つが、一方残りの部分のアミノ酸配列は全く異なっていた。全長377のアミノ酸残基より成る。3)発現パタ-ン:Oct-3をコ-ドする1.5kbのmRNAは未分化P19細胞中には多量に存在するが、レチノイン酸(RA)により分化誘導後は消失する。一方マウスにおいては、授精後10日以降を調べた限りでは、いずれの組織にもその発現は認められなかった。4)転写因子としての機能:種々のトランスフェクシオンの実験結果より、Oct-3はDNA結合能のみならず、結合した遺伝子の転写を活性化する能力も持つ事が確認された。
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