| Project/Area Number |
01655001
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
溝渕 潔 東京大学, 理学部, 助教授 (00092346)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大坪 栄一 東京大学, 応用微生物研究所, 教授 (10158800)
井口 八郎 京都大学, 理学部, 助教授 (20028195)
伊藤 維昭 京都大学, ウイルス研究所, 教授 (90027334)
中村 義一 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40114590)
中沢 淳 山口大学, 医学部, 教授 (90025594)
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| Project Period (FY) |
1989
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1989)
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| Budget Amount *help |
¥26,000,000 (Direct Cost: ¥26,000,000)
Fiscal Year 1989: ¥26,000,000 (Direct Cost: ¥26,000,000)
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| Keywords | 大腸菌ゲノムの編制 / 転写・翻訳制御因子 / tRNA遺伝子 / 分泌系内膜構成遺伝子 / 解糖系酵素遺伝子 / プリン生合成遺伝子 / IS因子とゲノムの再編 / 高度反復配列REP |
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| Research Abstract |
大腸菌ゲノム編成の全体像を明らかにするため、細胞活動の様々なレベルで重要な働きを担っている遺伝子、即ち、転写・翻訳系に関わるntrA、nusA、prfBなどの遺伝子、全tRNA遺伝子、分泌系内膜構成遺伝子、解糖系酵素遺伝子、プリン生合成遺伝子、DNA組換えや変換に関与する遺伝子の編制とゲノムの編成と再編成に関わる挿入因子ISや高度反復配列REPのゲノム上での分布と機能の解析を行った。まず、大腸菌tRNA遺伝子を新たに19個同定した。この結果、大腸菌tRNA遺伝子数は全部で79個存在し、これらは46種のtRNAに対応していて、41転写単位を構成していることが明らかとなった。次いで、転写・翻訳カスケード系に作用するnusAの変異に対するサプレッサー遺伝子を分離し、それがRNAポリメラーゼβ'サブユニットの変異であることを明らかにした。また分泌系内膜構成遺伝子編制の研究において、secY遺伝子産物中にリーダーペプチダーゼ認識部位の存在を見いだし、さらに、secY変異を抑制できるssyB、ssyDのクローニングを行った。解糖系酵素ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子の部位突然変異法を用いて調べた結果、触媒活性部位と調節部位の領域に区別することができた。新たに5種のプリン生合成遺伝子、purE、purK、purH、purD、purLの塩基配列を決定して、その編制像を明らかにした、一方、大腸菌のゲノム編成と再編成の研究においては、各種のIS因子の内、IS1__ー、IS2__ー、IS3__ー、IS5__ー、IS<30>___ーの染色体上の全位置を決定するとともに、IS2__ーとIS3__ーのHfr形成との関係や、IS1__ーによるargF遺伝子の転移機構に関する新たな知見を得た。また、REP配列が大腸菌遺伝子組換えのホットスポットであることを示唆する結果を得、この配列の機能の一端を明らかにすることも成功した。
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