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mutans streptococciのグルカン合成酵素を用いた齲蝕ワクチンの開発

Research Project

Project/Area Number 01870090
Research Category

Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 小児・社会系歯学
Research InstitutionKyushu Dental College

Principal Investigator

竹原 直道  九州歯科大学, 歯学部, 教授 (00038879)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山下 喜久  九州歯科大学, 歯学部, 講師 (20192403)
花田 信弘  九州歯科大学, 口腔衛生学教室, 講師 (70180916)
Project Period (FY) 1989 – 1991
Project Status Completed (Fiscal Year 1991)
Budget Amount *help
¥12,300,000 (Direct Cost: ¥12,300,000)
Fiscal Year 1991: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1990: ¥2,900,000 (Direct Cost: ¥2,900,000)
Fiscal Year 1989: ¥8,400,000 (Direct Cost: ¥8,400,000)
KeywordsStreptococcus mutans / Streptococcus sanguis / gtf-B遺伝子 / gtf-Id遺伝子 / 複製起点 / 形質転換 / Streptococcus sobrinus / gtfーB遺伝子 / gtfーId遺伝子 / プロモ-タ- / 齲蝕ワクチン / 非水溶性グルカン合成酵素 / Streptocococcus mutans / Streptocococcus sobrinus
Research Abstract

昨年度の計画では、プラスミドの複製起点に着目し、宿主菌体中のプラスミドのコピ-数を増加させることによりm-RNAの転写量の増加すなわち遺伝子産物の発現量の増加を計り、効率の高いワクチン原の精製を確立する予定であった。
Escherichia coliとStreptococcus mutans間のシャトルベクタ-であるpVA856による形質転換が比較的容易であったS.mutansを宿主菌として、E.coliの原理に基づいて、プラスミドの複製起点の調節を行なったが、コピ-数を増加させることはできず、gtf-B遺伝子産物の過剰産生変異株を作成することはできなかった。
また、宿主菌として、その染色体遺伝子にS.mutansのgtf-B遺伝子およびS.sobrinusのgtf-Id遺伝子のいずれとも相同部分を持たず、さらにmutans streptococciと分泌機構が類似しているS.sanguisを用いて実験を行なったが、S.sanguisの形質転換は実現できなかった。しかしながら、S.sanguisの形質転換は理論的には可能であるので、今後さらに研究を続けてS.sanguisの形質転換を成功させる予定である。S.sanguisに関する一連のデ-タより、形質転換が実現できれば、gtf-Bおよびgtf-Id遺伝子産物の菌体外への分泌は成功すると考えられる。
今後は、S.sanguisを宿主菌として、両遺伝子のプロモ-タ-部分の修飾あるいはプラスミドの複製起点の調節により、菌体外画分から多量の不溶性グルカン合成酵素を精製し、本研究を工業レベルまでもっていく予定である。

Report

(3 results)
  • 1991 Annual Research Report
  • 1990 Annual Research Report
  • 1989 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All Other

All Publications (10 results)

  • [Publications] Nobuhiro Hanada: "Cloning of a Streptococcus sobrinus gtf gene that encodes a glucosyltransferase which produces a high-molecular weight water-soluble glucan" Infection and Immunity. 59. 3434-3438 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Nobuhiro Hanada: "Evidence for the isolation of the Streptococcus sobrinus gtf U gene that encodes the glucosyltransferase P4" FEMS Microbiology letter.

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Nobuhiro Hanada: "The gtf gene coding for the fourth glucosyl transferase is present on the Streptococcus sobrinus AHT chromosomol DNA" Journal of Dental Health. 40. 89-93 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] R.R.B.RUSSELL: "Characterization of the product of the gtf S gene of Streptococcus downei,a primerーindependent enzyme synthesizing oligoーisomaltosaccharides" Jounal of General Microbiology. 136. 1631-1637 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 花田 信弘: "Streptococcus sobrinusの精製第4グルカン合成酵素と遺伝子クロ-ニング" 口腔衛生学会雑誌. 40. 514-515 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] 柴田 幸江: "Streptococcus sobrinusの精製第3グルカン合成酵素と遺伝子クロ-ニング" 口腔衛生学会雑誌. 40. 520-521 (1990)

    • Related Report
      1990 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Yamashita,N.Hanada and T.Takehara: "Purification of fourth glucosyltransferase from Streptococcus sobrinus" Journal of Bacteriology. 171. 6265-6270 (1989)

    • Related Report
      1989 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Yamashita and T.Takehara: "Effect of magnesium ions on secretion of glucosyltransferase from Streptococcus sobrinus" Microbios. 60. 177-182 (1989)

    • Related Report
      1989 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Shibata,Y.Yamashita,N.Hanada and T.Takehara: "Molecular cloning of sucrose-hydrolyzing enzyme genes from Streptococcus mutans in bacteriophage lambda L 47" 口腔衛生学会雑誌. 39. 762-766 (1989)

    • Related Report
      1989 Annual Research Report
  • [Publications] N.Hanada,Y.Yamashita,Y.Shibata and T.Takehara: "The gtf gene coding for the fourth glucosyltransferase is present on the Streptococcus sobrinus AHT chromosomal DNA" 口腔衛生学会雑誌. 40. 89-93 (1990)

    • Related Report
      1989 Annual Research Report

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Published: 1989-04-01   Modified: 2019-02-15  

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