三量体Gタンパク質G12ファミリーによる神経機能調節の研究

• Project/Area Number: 01J03814
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Neurochemistry/Neuropharmacology
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 山口 賀章 京都大学, 生命科学研究科, 特別研究員(DC1)
• Project Period (FY): 2001 – 2003
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2003)
• Budget Amount: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000); Fiscal Year 2003: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2002: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2001: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: G12ファミリー / Rho / GPCR / 細胞内局在 / PP5 / PP5-TPR / thrombin / LPA / yeast two-hybrid / 神経可塑性 / 細胞膜移行

Research Abstract

Gα12/13の新規活性測定法の開発と、Gα12/13のレセプターとの共役の特異性決定因子の解明
私は、2002年にセリンスレオニンフォスファターゼ5(PP5)が三量体Gタンパク質G12ファミリーの新規エフェクターであることを見いだした。2003年に私はPP5のTPRドメインが活性型Gα12/13と特異的に結合するという特性を利用して、TPRドメインによるpull-downにより、Gα12/13の活性を測定する新規活性測定法を開発した。
Gα12とGα13は、下流でRhoという共通の分子を利用する一方、上流のレセプターとの共役に関しては、それぞれに特異性があることが、Gα12/13のドミナントネガティヴ体を用いて示されていた。そこで、私は上記の新規アッセイ法を用いてthrombin及びLPAがGα12及びGα13を、それぞれ特異的に活性化すること、及びこの特異性が、Gα12/13のN末端アミノ酸配列の差に起因することを解明した。近年、神経細胞において、Gα12は細胞体、Gα13はneuropilと局在が異なることが報告された。このことから、Gα12/13とレセプターの細胞内局在の違いが、それらの共役及びシグナリングに重要であると考えられる。

Research Products

• [Publications] Yoshiaki Yamaguchi et al.: "N-terminal Short Sequences of α subunits of G12 family defermine selective couplings to Receptors."The Journal of Biological Chemistry. 278巻・17号. 14936-14939 (2003)
• [Publications] Yamaguchi, Y. et al.: "Gα12 and Gα13 interact with Ser/Thr Protein Phosphatase Type 5 and Stimulate Its Phosphatase Activity"Current Biology. 12. 1353-1358 (2002)