| Project/Area Number |
02206206
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
相沢 慎一 理化学研究所, 分子腫瘍学研究室, 副主任研究員 (60073011)
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| Project Period (FY) |
1990
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1990)
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| Budget Amount *help |
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 1990: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
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| Keywords | ジ-ントラップ / ES細胞 / キメラマウス / 変異マウス |
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| Research Abstract |
突然変異体の解析は生命現象を解明する上での手がかりとなり、変異体の集積量はその分野の研究に大きな影響力を与える。哺乳動物に於いてもクロ-ニングされた機能未知な遺伝子に付いてその機能を解析するための実験系は開発されつつあるが、ある現象に関わる未知遺伝子を探索するための方法の開発が大きな課題として残されている。無論この様な方法は遺伝子と表現型を直接結び付け得るもの出なければなない。導入DNAの染色体への無作為な組み込みを利用した挿入変異体の作成ー導入DNAをプロ-ブにした挿入部位遺伝子の同定が注目されるが、その頻度は10ﾟに1程度の頻度であり、これをマウス個体あるいは胚について行うことはできない。マウス4日胚より得られる胚性未分化細胞(ES細胞)が培養でき、ES細胞由来の子孫マウスの得られることは、マウス個体を1ケ1ケの細胞として取り扱えることを意味し、培養下では選別も可能である。そこで(1)ES細胞にLacZ遺伝子をレポ-タ-遺伝子として導入し、(2)ES細胞をin vivo,in vitroで分化させレポ-タ-遺伝子を特異的に発現するものを予備的にスクリ-ニングし、(3)キメラマウスを作成して特異的発現を解析、(4)ホモ変異マウスを作成して表現型を解析、(5)挿入部位遺伝子を導入DNAをマ-カ-として同定・解析することを試みることとした。文年度は(1)効率よくジ-ントラップを起こすためのベクタ-の改変を重ねると共に、(2)同ベクタ-を導入したES細胞を収集し、(3)in vitro.in vivoの分化系を用いLacZ発現様式を解析、(4)一部キメラマウス作成による検討を行った。
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Report
(1 results)
Research Products
(11 results)
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[Publications] Suda,Y.,Aizawa,S.,Furuta,Y.,Yagi,T.,Ikawa,Y.,Saitoh,K.,Yamada,Y.,Toyoshima,K.and Yamamoto,T.: "Induction of a variety of tumors by cー<erbB2>___ー and colnal nature of lymphomas even with the mutated gene (Val659→Glu659)." EMBO J.9. 181-190 (1990)
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[Publications] Aizawa,S.,Suda,Y.,Furuta,Y.,Yagi,T.,Takeda,N.,Watanabe,N.,Nagayoshi,M.and Ikawa,Y.: "<Env>___ーーderived gp55 gene of Friend spleen focusーforming virus specifically induces neoplastic proliferation of erythroid progenito cells." EMBO J.9. 2107-2116 (1990)
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[Publications] Lee,GーH.,Li,H.,Ohtake,K.,Nomura,K.,Hino,O.,Furuta,Y.,Aizawz,S.and Itagawa,T.: "Detection of activated cーHaー<ras>___ー oncogene in hepatocellular carcinomas developing in transgenic mice harboring albumin promoterーregulate simian virus 40 gene." Carcinogenesis. 11. 1145-1148 (1990)
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[Publications] Yagi,T.,Ikawa,Y.,Yoshida,K.,Shigetani,Y.,Takada,N.,Mabuchi,I.,Yamamoto,T.,and Aizawa,S.: "Homologous recombination at cー<fyn>___ー locus of mouse embrynic stem cells with diphteria toxin A fragment gent in negative selection." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 9918-9922 (1990)
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