温度感受性レトロウイルスを用いた造血幹細胞株の樹立と分子生物学的解析
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02256205
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
杉山 治夫 大阪大学, 医学部, 助手 (70162906)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川 雅史 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
相馬 俊裕 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
三宅 正剛 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
小守 寿文 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
岡 芳弘 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
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| Project Period (FY) |
1990
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1990)
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| Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 1990: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Keywords | 温度感受性Abelsonウイルス / B細胞の分化 / 免疫グロブリンH鎖遺伝子 / T細胞抗原レセプタ-遺伝子 |
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| Research Abstract |
我々が分離したAbelsonウイルスが温度感受性変異株でトランスフォ-ムしたマウス未塾B系細胞株SPL2ー1ー2を樹立した。この細胞株は、全く免疫グロブリンを産生していなく、その遺伝子は、V_HDJ_H^ー/Germlineの状態にある。この細胞株は、提温(35℃)で培養すると、増殖するのみであるが、培養温度を高温(39℃)に上げると、細胞は、transformed stateからuntransformed stateにかわり、それによって、分化が誘発される。まず免疫グロブリンH鎖遺伝子の再構成が起こり、Germline Allele上で、DtoJ_H結合、つづいて、V_HtoDJ_H結合が起こる。そして、約2ヵ月め39℃での培養で、ほぼ100%の細胞で、DJ_H結合及び、V_HDJ_H結合がおこる。このDtoJ_H結合に際し、12コのD geneのうち、どのD geneが最もよく使用されるのかを、解析したところ、もっとも5'側にあるD_<FL16.1>と、もっとも3'側にあるD_<Q52>の2種のD geneが、最も頻回に、使用されることがわかった。なぜ、最も5'側のDと、もっとも3'側のDが、頻回に使用されるのかは、不明である。また、39℃での培養中、免疫グロブリンH鎖遺伝子とともに、T細胞抗原レセプタ-γ鎖(TCRγ)遺伝子の再構成も起り、約12ヵ月で100%の細胞で、TCRγ遺伝子の再構成が起った。そして、この再構成の大部分は、V_<γ2>toJ_<γ2>結合であった。このjoiningの多くは、normalーsized mRNAを産生していた。inーframeの再構成も見い出しているが、タンパクにまでなっているかは、検討中である。
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Report
(1 results)
Research Products
(7 results)
