転写制御遺伝子群の構造と発生過程における発現

Research Project

Project/Area Number	02258210
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	高橋直樹名古屋大学, 理学部, 助教授 (30179501)
Project Period (FY)	1990
Project Status	Completed (Fiscal Year 1990)
Budget Amount *help	¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000) Fiscal Year 1990: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywords	遺伝子 / 転写制御 / ホメオボックス / 発生 / 哺乳類 / 分子生物学
Research Abstract	ショウジョウバエホメオボックス遺伝子Antennapediaに対応するマウス遺伝子Hoxは、現在までに約30クロ-ン化されている。これらの遺転子は4つのクラスタ-形成しており(Hox1,Hox2,Hox3,Hox4)、in situハイブリダイゼ-ションなどの結果から、発生過程で主として外胚葉由来の神経管および中胚葉由来のいくつかの組織で発現していること、クラスタ-中の配列順序と頭尾軸に沿った発現領域との間に相関関係があることが明らかになっている。我々も新たにクロ-ン化したHox3遺伝子についてin situハイブリダイゼ-ションによって、発生過程におけるその発現領域を調べた結果、Hox3クラスタ-についても他のクラスタ-と同様な、クラスタ-中の配列順序と前後軸に沿った発現領域との関係があることが明らかになった。 T7プロモ-タ-を用いた大腸菌発現ベクタ-にマウスホメオボックス遺伝子断片(Hox1.1,Hox3,1,Hox3.5)を結合したリコンビナントを作製し、合成した蛋白に対する抗体を調製した。この抗体を用いて、ランダムな25ヌクレオチドの配列にin vitroで結合したホメオボックス遺伝子産物複合体をアフィニティ-精製、クロ-ン化し、塩基配列を決定した。その結果Hox遺伝子産物はTAATをコアとする塩基配列に選択的に結合することが明らかになった。この配列はこれまでに報告されているホメオボックス遺伝子産物の結合配列と類似性があった。