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カボチャのアスコルビン酸酸化酵素遺伝子の組織特異的発現とその制御機構の解明

Research Project

Project/Area Number 02261214
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

江坂 宗春  広島大学, 生物生産学部, 助教授 (70151975)

Project Period (FY) 1990
Project Status Completed (Fiscal Year 1990)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1990: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Keywordsアスコルビン酸酸化酵素 / 遺伝子発現 / カボチャ / cDNA / 組織特異性 / 発泌 / 誘導 / カルス
Research Abstract

カボチャ果実組織からゲノムDNAを抽出し、アスコルビン酸酸化酵素cDNAをプラ-ブとしたサザンブロットをおこなった結果、アスコルビン酸酸化酵素遺伝子のハプロイドゲノムあたりのコピ-数はシングルコピ-と推定した。アスコルビン酸酸化酵素cDNAをプロ-ブとしたノ-ザンブロット法によりカボチャ細胞におけるアスコルビン酸酸化酵素の種々の生産調節が転写レベルで制御されているのかどうかを調べた。カボチャ果実組織からのカルス化にともないアスコルビン酸酸化酵素活性およびタンパク質が急激に増大するが、ノ-ザンブロットの結果からアスコルビン酸酸化酵素mRNAもカルス化にともない増大することがわかった。ホルモンである2、4ーDをぬくとアスコルビン酸酸化酵素mRNAは増大しないこと、同じカボチャの分泌性酵素であるキチナ-ゼは2、4ーDあるなしにかかわらず増大することなどから、アスコルビン酸酸化酵素は2、4ーDにより酸導されるものと思われる。すなわち、アスコルビン酸酸化酵素遺伝子の転写がオ-キシンにより制御されている可能性が示された。一般に、アスコルビン酸酸化酵素はウリ科植物の果実組織に多量に発現する酵素とされていた。しかし、ノ-ザンブロットの結果から成長中の葉組織にも有意なアスコルビン酸酸化酵素mRNAが認められた。一方、カボチャ種子中にはアスコルビン酸酸化酵素mRNAは認められなかったが、吸水発茅にともなって、急激にアスコルビン酸酸化酵素mRNAが蓄積されていった。これらの結果から、アスコルビン酸酸化酵素の生産量が細胞の成長や増殖と相関しているように思われる。アスコルビン酸酸化酵素が細胞壁に局在する酵素であることから、アスコルビン酸酸化酵素が細胞壁の生長になんらかの関与をしているのかもしれない。現在、アスコルビン酸酸化酵素のゲノム遺伝子のクロ-ニングを試みており、今後、さらにアスコルビン酸酸化酵素伝子の発現調節の機構を遺伝子レベルで明らかにしていきたい。

Report

(1 results)
  • 1990 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Muneharu Esaka: "Molecular Cloning and Nucleotide Seguence of FullーLength cDNA for Ascorbate Oxidase from Cultured Pumpkin Cells" Eur.J.Biochem.191. 537-541 (1990)

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  • [Publications] Muneharu Esaka: "Purification and Characterization of Abundant Secreted Protein in SuspensionーCultured Pumpkin Cells" Plant Physiol.93. 1037-1041 (1990)

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  • [Publications] Muneharu Esaka: "Stimulation of Ascorbate Oxidase Secretion from Cultered Pumpkin Cells by Eosine Yellouish and Potassium Salicylate" Phytochemistry. 29. 1547-1549 (1990)

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  • [Publications] 江坂 宗春: "化学と生物" 学会出版センタ-, 3 (1990)

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Published: 1990-04-01   Modified: 2016-04-21  

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