DNA細胞内移入法によるホルモン産生細胞の作製と細胞移植の研究

• Project/Area Number: 02807109
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General surgery
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 里見 進 東北大学, 医学部, 講師 (00154120)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大河内 信弘 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (40213673) ; 藤盛 啓成 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (50238622) ; 土井 秀之 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (90188839) ; 帯刀 益男 (帯刀 益夫) 東北大学, 抗酸菌研究所, 教授 (10099971) ; 三浦 俊治 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (50209714) ; 小熊 司郎 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (00194522)
• Project Period (FY): 1990 – 1991
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1991)
• Budget Amount: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 1991: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000); Fiscal Year 1990: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: DNA細胞内移入法 / PTH産生細胞株

Research Abstract

従来より当教室にて継代培養してきた、ヒトPTH産生DNAをtransferしたマウス線維芽細胞株を用いて実験を継続した。前年度に行なったCa濃度変下、P濃度変下でのPTH産生能の検討に加えて、本年度はVitamin D 投与下、ステロイドホルモン投与下での培養液中のPTHを、CーPTH、NーPTH、MーPTH、intactーPTHに分けて検討したが、いずれもPTHの産生を認めなかった。DNA transferに際り繰り込んだZnの濃度負荷には反応してホルモンを産生することより、本細胞株にはCa,P,VitaminーD,ステロイドに対するreceptorが無いものと考えられる。臨床応用により近ずけるために、現在DNA読取りの発現をCaにかえる系を実験中である。PTH産生細胞の抗原性を調べるために同細胞をMMC処理し、stimulatorとして用いるMLC assayをおこなった結果、本細胞株には抗原性が少ないことが判明した。CTL assayについても検討中である。ILー2 dependent 細胞株や胎児肝細胞株へのDNAの移入も実験中である。
in vivoの実験として上皮小体切除マウスへの移入を行なったが、マウス血清よりのヒトPTHの検出は認められなかった。しかしながら、マウスの腎皮膜下に移植した細胞の存在は、組織免疫化学反応から確認されており、又その細胞は再度培養系に戻した場合、Znの刺激によりホルモンを産生する。以上より本細胞は十分に生体内に生着し、条件さえ整えばホルモンを産生しうるとの結果を得た。今後はalloの移植系への応用を試みる予定である。