Ph^1染色体陽性Stem cellの増殖と分化に関する研究

Research Project

Project/Area Number	02807233
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Hematology
Research Institution	Kochi Medical School
Principal Investigator	久保西一郎高知医科大学, 医学部, 講師 (10153339)
Project Period (FY)	1990
Project Status	Completed (Fiscal Year 1990)
Budget Amount *help	¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000) Fiscal Year 1990: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Keywords	CML / Ph^1 / 分化 / 増殖 / 細胞株 / ヌ-ドマウス
Research Abstract	2人の慢性骨髄性白血病(CML)患者より得られた細胞をヌ-ドマウス皮下に移植し、in vivoで継代移植可能なPh^1染色体陽性、bcr遺伝子の再構成を示す2系の細胞株(PSCLー1,PSCLー2)を樹立した。この2つの細胞株は共にCD13,CD33等骨髄系細胞のマ-カ-を有する未熟な形態を示す細胞から成り、in vivoでの継代移植が可能で現在までPSCLー1は15代目まで、PSCLー2は5代目まで継代が可能となっている。一方in vitroで培養を行うとこれら2系の細胞株は共に全く反対にその増殖能を失い、全ての細胞が主として顆粒球(好中球,好酸球,好塩基球)及び単球へと分化することが判明した。以上のことからこれら2系の細胞株はPh^1陽性のmyeloid stem cell lineであることが示された。申請者は以前よりCML細胞の増殖分化機構の研究のためそれに適した細胞株を得るための実験を行ってきたが、今回動物体内では未分化な芽球として増殖するが、in vitroでは成熟顆粒球及び単球へと分化し得る2系のPh^1陽性myeloid stem cell lineを樹立した。Ph^1染色体陽性のstem cell lineが条件の違いにより増殖したりあるいはその増殖が抑制されて成熟細胞へと分化し得ることが示されたことから、CML細胞の増殖と分化の機構解明の目的にかなった細胞株が得られたと考えられる。in vitroにおいてこれら2系の細胞株が維持できるよう各継代ごとに培養を行い、又種々の増殖因子を加えて検討しているが現在までのところ、全ての細胞は1〜3カ月の間に分化してしまいin vitroの増殖系は得られていない。最近申請者は胸腺上皮細胞由来の細胞株の樹立に成功した。種々の増殖分化促進因子の産生が胸腺上皮細胞には知られているので左在その培養上清を用いてPSCLー1,PSCLー2に対する影響を検討中です。