| Project/Area Number |
03202229
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
川西 正祐 (1992) 京都大学, 医学部, 講師 (10025637)
錦織 千佳子 (1991) 京都大学, 保健診療所, 助手 (50198454)
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| Project Period (FY) |
1992
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1992)
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| Budget Amount *help |
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1991: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | 環境変異原 / 重金属化合物 / ヒト遺伝子損傷 / 複合汚染 / ニッケル化合物 / 3-ヒドロキシアントラニル酸 / 過酸化水素 / Cu(II) / 太陽光 / 紫外線 / ras遺伝子 / 点突然変異 / 皮膚腫瘍 |
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| Research Abstract |
本研究の目的はAmesテスト陰性の発がん物質と金属との相互作用によりヒト偉伝子が損傷される機構を解明することである。本年度は種々のニッケル化合物、およびトリプトファン代謝物の一つである3-ヒドロキシルアントラニル酸(3-HAA)を選び、DNA分子レベルおよび細胞レベルでヒト偉伝子損傷を検討した。細胞レベルでのDNA損傷はパルスフィールドゲル電気泳動を行ない測定した。
ニッケル化合物(1)ヒト培養細胞(Hela、Raji細胞)を硫化ニッケル(NIS、Ni_3S_2)で処理すると二本鎖DNA切断が認められた。アルカリ処理でDNA切断が増加することから、一本鎖DNA切断も推定された。(2)カタラーゼ阻害剤、GSH合成阻害剤やGSH消去剤で、NiSによる二本鎖DNA切断が増加したことから、過酸化水素の関与が示唆された。(3)Ni_3S_2で処理したHeLa細胞では8-OH-dGが有意に増加した。このことは我々がin vitroで明かにした酸素ラジカルによるDNA損傷が細胞内でも起こる可能性を示している。3-HAA(1)3-HAAはCu(II)の存在下でDNA切断をもたらした。カタラーゼとバソキュプロインの添加によりDNA損傷が抑制されることから、H_2O_2とCu(I)の関与が示された。OHラジカル捕捉剤による抑制は少くな、HOラジカルがDNA損傷に果たす役割は小さいと考えられる。(2)3-HAAにMn(II)を加えた後Cu(II)を加えたDNAの方がMn(II)のない場合に比べてDNA損傷が大きかった。(3)3-HAAはCu(II)の存在下でcalf thymus DNA中の8-OHdGを増加させた。3-HAAとCu(II)から生じたH_2O_2とCu(I)から活性酸素が生成しDNAを損傷することが示唆された。Mn(II)はH_2O_2の生成を促進すると考えられる。
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