| Project/Area Number |
03262209
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
中村 千春 神戸大学, 農学部, 助教授 (10144601)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森 直樹 神戸大学, 農学部, 助手 (60230075)
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| Project Period (FY) |
1991
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1991)
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| Budget Amount *help |
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 1991: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
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| Keywords | タバコ / オ-キシン受容体 / 発根遺伝子群 / 毛状根 / 遺伝子発現 |
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| Research Abstract |
1.タバコ膜結合型オ-キシン受容体(ABP)の細胞内所在とサイトカイニンによる活性誘導:Agrobacterium tumefaciens LBA4210(gene4^-)によるタバコの形質転換体を材料に、ABPの細胞内所在とサイトカイニンによるオ-キシン結合活性の誘導について調査した。ABPのオ-キシン結合活性の50%以上が存在した800g画分には、形質膜の標識酵素と液胞膜の標識酵素の活性が認められた。この画分のABPはミクロゾ-ムのABPと同様にオ-キシン結合活性がkinetinにより大幅に増加した。一方、ミクロゾ-ムのABPはTriton Xー100で可容化されたが、この画分のABPは用いた3種の界面活性剤では可容化されなかった。加えて、形質膜のABPとオ-キシンとの結合には他の因子が関与している可能性が示唆された。
2.トウモロコシABPのcDNA塩基配列を利用したPCR法によるABP遺伝子の増幅:トウモロコシで単離されたABPーcDNAの塩基配列を用いてトウモロコシ・パンコムギとタバコのゲノミックDNAからABP遺伝子の増幅を試み、約400塩基からなる主要断片を含む複数の増幅産物を得た。
3.毛状根を利用したタバコ発根遺伝子群のクロ-ニング:Ag.rhizogenes15834によるタバコの毛状根からcDNAバンクを作成し、毛状根組織と根以外の組織から得たcDNAおよびAg.rhizogenes Ri plasmid DNA(TーDNA)を用いた分別スクリ-ニングにより毛状根特異的cDNAのクロ-ンを6種類得た。
4.Agrobacteriumによるタバコの発根変異株の形質転換:Ag.tumefaciensとAg.rhizogenesを用いてタバコの発根変異株2系統(いづれもオ-キシン耐性変異株)の形質転換体の作成を試みた。両変異株ともrhizogenesでは形質転換体が得られず、1系統ではtumefaciensによる形質転換体の全てでテラト-マ状の茎葉分化が認められ、変異株のオ-キシン応答が野生株のそれと異なっていることが示唆された。
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