合成オリゴペプチドを用いたTSH受容体抗体の免疫測定法の開発と臨床応用

Research Project

Project/Area Number	03454506
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Laboratory medicine
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	網野信行大阪大学, 医学部, 教授 (60028694)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	館純子大阪大学, 医学部附属病院, 医員高田薫大阪大学, 医学部, 助手 (80216655) 岩谷良則大阪大学, 医学部, 助教授 (60168581) 玉置治夫大阪大学, 医学部, 講師 (20221400)
Project Period (FY)	1992 – 1993
Project Status	Completed (Fiscal Year 1992)
Budget Amount *help	¥5,800,000 (Direct Cost: ¥5,800,000) Fiscal Year 1992: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000) Fiscal Year 1991: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,900,000)
Keywords	TSH受容体 / オリゴペプチド / バセドウ病 / 受容体抗体 / エンザイムイムノアッセイ / 自己抗体
Research Abstract	TSH受容体の細胞膜外域及び細胞外ループ状領域の8種類のオリゴペプチドを合成し(hTSH RI:639-668(ループ),R2:560-580(ループ),R4:32-56,R5:352-383,R6:160-191,R7:90-122,R8:237-294,R9:310-342),バセドウ病及び橋本病患者血の免疫グロブリンとの結合能,FRTL-5細胞のcAMP産生への影響を調べ受容体抗体の作用部位を検索した。 (1)免疫沈降反応;R6はバセドウ病検体と有意の結合の増加を示したが,R1,R3,R4,R7,R9は単独またはR6と混和した場合でも有意の増加を示さなかった。(2)固相化オリゴペプチドとの結合性;バセドウ病53例中5例が,橋本病でもTSH高値26例中4例がRIとの有意の特異的結合を示した。(3)hTSHによるFRTL-5細胞のcAMP産生に及ぼすペプチドの影響;今回どのペプチドもhTSHによるcAMP産生に有意な抑制作用はみられなかった。以上の結果より,受容体一抗体結合の検索には一次構造のみのオリゴペプチド使用では不十分で更に三次構造も考慮した蛋白構造の検討が必要と考えられた。