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増殖因子受容体を標的とする新しいDDSの開発と実用化の試み

Research Project

Project/Area Number 03557053
Research Category

Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field General surgery
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

清水 信義  慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50162706)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 木村 正己  実中研, 大塚製薬, 顧問
蒲生 忍  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90122308)
奥 直人  静岡大学, 薬学部, 助教授 (10167322)
伊藤 文昭  摂南大学, 薬学部, 教授 (80111764)
Project Period (FY) 1991 – 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥16,900,000 (Direct Cost: ¥16,900,000)
Fiscal Year 1993: ¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 1992: ¥4,700,000 (Direct Cost: ¥4,700,000)
Fiscal Year 1991: ¥8,800,000 (Direct Cost: ¥8,800,000)
Keywords上皮増殖因子レセプター(EGFR) / モノクローナル抗体(B4G7) / ドラッグデリバリー・システム(DDS) / 遺伝子導入 / 接合体 / イムノトキシン / イムノジーン / 扁平上皮癌 / 固相法 / 殺細胞効果 / 癌細胞 / 抗体結合型接合体 / リガンド結合型接合体 / 上皮増殖因子受容体(EGFR) / イムノトキシン療法 / 低アフィニティ-タイプ / モノクロ-ナル抗体(B4G7) / ドラッグデリバリ- / リポソ-ム / 細網内皮系
Research Abstract

我々はこれまでに、EGFレセプター(EGFR)に対するモノクローナル抗体B4G7と毒性蛋白質Geloninの接合体が、イムノトキシンとして扁平上皮癌細胞のターゲット療法に有効であることを示してきた。今回、このB4G7抗体にポリリジンを接合し、さらに遺伝子DNAをアフィニテイー結合させた複合体“イムノジーン"を用いて、EGFRを介する遺伝子導入と細胞内での発現に成功した。
モノクローナル抗体B4G7とポリリジンは、それぞれSPDPおよびイミノチオレインで活性化しジスルフィド結合させて接合体を作製した。この接合体は遺伝子DNA(CAT:クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ)と定量的にアフィニティー結合して抗体/DNA複合体を形成した。この複合体で癌細胞NAを24時間処理すると、CAT-DNAはEGFレセプターと結合しエンドサイトーシスによって細胞内に導入された。その結果、導入12時間後に細胞のCAT活性が観察され72時間まで上昇し続けた。CAT遺伝子の導入と発現は複合体に特異的で、抗体・ポリリジン・DNAの混合物では起らなかった。
モノクローナル抗体B4G7を利用する本遺伝子導入法は、カルシウム共沈法やエレクトロポレーション法と異なり、ほとんど細胞に損傷を与えない。また、EGFRを発現する細胞のみに特異的に遺伝子を導入することができる。さらに、ウイルスを利用する遺伝子導入法に付随するウイルスゲノムの持込みも皆無なので、極めて理想的な方法である。
今後は、癌抑制遺伝子やアンチセンス遺伝子などの発現、さらにヘルペスウイルスチロシンキナーゼとガンシクロビルの併用による殺細胞効果を検討し、臨床応用への可能性を探る。

Report

(3 results)
  • 1993 Annual Research Report
  • 1992 Annual Research Report
  • 1991 Annual Research Report
  • Research Products

    (13 results)

All Other

All Publications (13 results)

  • [Publications] Shimizu,N.: "Epidermal Growth Factor Receptors in Lung Cancer." In Lung Biology in Health and Disease ¨Lung Cancer Differentiation¨, (eds) Bernal,S.D.and Baylin,S.,marcel dekker,inc.,New York. 137-158 (1992)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] Shimizu,N.: "Terapeutic Application of Growth Factors;The EGF Receptor-Hyperproducing Tumors and Immuno-Targeting." Clinical Pharmacology and Therapeutics;Symposium 20. Abst. 63- (1992)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] Komiyama,S.: "Heterogeneity in EGF-Responsiveness and Tumor Growth of Cell Lines derived from a Tumor of a Patient with Maxillary Cancer." Ann.Otal.Rhinol.Laryngol.101. 519-524 (1992)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] 清水 信義: "サイトカインとサイトカイン受容体の遺伝子マッピング" 日本臨床、特集「サイトカイン・サイトカイン受容体」. 50. 2-4 (1992)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] 蒲生 忍: "上皮増殖因子とそのレセプター:構造と機能" 日本臨床、特集「サイトカイン・サイトカイン受容体」. 50. 193-200 (1992)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] 石戸谷 淳一: "頭頚部扁平上皮癌における癌抑制遺伝子p53の異常発現" 頭頚部腫瘍学会誌. (1993)

    • Related Report
      1992 Annual Research Report
  • [Publications] Fukuyama,R.: "Detection of EGF Receptors and E-Cadherins in the Basolateral Membrane of A431 Cells by Laser Scanning Flourescence Microscopy." Jpn.J.Cancer Res.81. 8-11 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Shimizu,N.: "EGF Receptor-Hyperproducing Tumors and Immunotoxin Targeting." In Frontiers of Mucosal Immunology (eds) Tsuchiya,M.et al.Elsevier Science Publ.B.V.,Amsterdam. 1. 105-108 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Fukuyama,R.: "Flow Cytometric Analysis of the Expression of 9A3 Antigen,E-Cadherin and EGF Receptor in TMK-1 Stomach Cancer Cells." Int.J.Cancer. 48. 81-84 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Fukuyama,R.: "Expression of Epidermal Growth Factor (EGF) and EGF Receptor in Human Tissues." J.Exp.Zool. 258. 336-343 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Shimizu,N.: "EGF Receptor in Lung Cancer." In Lung Biology in Health and Disease “Lung Cancer Differentiation", (eds) Bernal,S.D.and Baylin,S.,marcel dekker,inc.,New York. 131-152 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Osaku,M.: "Targeted Killing of Squamous Carcinoma Cells by a Monoclonal Antibody-Peplomycin Conjugate with Recognizes the EGF Receptor." Anticancer Res.11. 1951-1956 (1991)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report
  • [Publications] Komiyama,S.: "Heterogeneity in EGF-Responsiveness and Tumor Growth of Cell Lines derived from a Tumor of a Patient with Maxillary Cancer." Ann.Otal.Rhino.Laryng.(1992)

    • Related Report
      1991 Annual Research Report

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Published: 1991-04-01   Modified: 2016-04-21  

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