植物の感染防御応答におけるMAPキナーゼ情報伝達系の機能解析

Research Project

Project/Area Number	03J01960
Research Category	Grant-in-Aid for JSPS Fellows
Allocation Type	Single-year Grants
Section	国内
Research Field	植物保護
Research Institution	National Institute of Agrobiological Sciences
Principal Investigator	加藤新平独立行政法人農業生物資源研究所, 生理機能研究グループ, 特別研究員(PD)
Project Period (FY)	2003 – 2005
Project Status	Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help	¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000) Fiscal Year 2005: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000) Fiscal Year 2004: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000) Fiscal Year 2003: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywords	耐病性 / 情報伝達 / リン酸化 / MAPキナーゼ / カルシウム / カルモジュリン
Research Abstract	カルモジュリン(CaM)は真核生物に普遍的なCa^<2+>結合タンパク質であり、Ca^<2+>依存的・非依存的に標的タンパク質に結合しその活性を調節する。我々は新規なCaM結合タンパク質としてMitogen-activated protein kinase (MAPK)脱リン酸化酵素(NtMKP1)を同定した。MAPKはMAPKカスケードと呼ばれる情報伝達経路を構成し、細胞外の刺激を細胞内の応答へと伝達する真核生物に普遍的かつ重要な情報伝達因子である。NtMKP1はタバコのストレス応答性MAPKであるSIPKを脱リン酸化し不活性化した。また、NtMKP1を過剰発現させた形質転換タバコにおいて傷害によるSIPKの活性化が顕著に抑制された。発現タンパク質を用いた解析より、NtMKP1の脱リン酸化活性はSIPKとの結合により顕著に活性化され、CaMとの結合によっては活性化されないことが明らかになった。アミノ酸置換クローンを用いた解析より、NtMKP1とSIPKの結合にはNtMKP1の41番目のリジンと43番目のアルギニンおよびSIPKの350番目のアスパラギン酸が重要な役割を果たすことが明らかになった。N.benthamianaにおける一過的発現系を用いたin vivoでの解析からも、NtMKP1がSIPKと結合し不活性化するのにNtMKP1の41番目のリジンと43番目のアルギニンが重要でありCaMの結合は必須ではないことが明らかになった。