| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川名 尚 東大, 医・産婦人科学, 教授 (90010272)
神田 忠仁 予研, 遺伝子解析学, 室長 (60134615)
松倉 俊彦 予研, 腫瘍ウイルス学, 主任研究官 (70100097)
岩本 愛吉 東大, 医・細菌学, 助教授 (10133076)
藤永 恵 札幌医大癌研, 分子生物学, 教授 (10045338)
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| Budget Amount *help |
¥26,000,000 (Direct Cost: ¥26,000,000)
Fiscal Year 1992: ¥26,000,000 (Direct Cost: ¥26,000,000)
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| Research Abstract |
できるだけ多種類の性器型HPV(gHPV)のDNAを効率よくPCR法で増幅できるconsensus primerの開発と,増幅したDNAの型別判定法の開発を目指して,E6-E7領域で増幅して制限酵素切断地図で判定する方式,L1 5'末領域で増幅して制限酵素切断地図で判定する方法,及び,L1 3'末領域で増幅して,膜上に固定した標準HPV DNAとのハイブリッド形成率で判定する方式の3方式が班員によって開発されてきた.これらの異なる方式を用いて,同一試料を調べた場合,どれだけ整合性のある判定結果を与えるか,また,その結果は,サザン法の結果と一致するかを共同研究として調べた.すなわち,患者組織などから精製したDNA,計20種類,その内訳はHPVについて多様で,提供者のもとでHPVの型別判定が不能であったものやウイルスDNAが不検出であったものを調査対象とした.予備的な調査結果(詳細は紙面の都合で省略)は,これらの方法に整合性のあることを示唆するものであった.
上とは別に,疣贅様表皮発育異常症要因であるHPV群や皮膚型HPV群の検出に都合の良いCONSENSUS PRIMER対が各々開発された.
昨年度の2クローンのHPV DNAに続き,本年度も新型と判断されるgHPV DNAを子宮頚部異形成病変から分離して,国際分類委員会に照会した.昨年度報告分の2つのクローンについてもE6,E7,L1領域の塩基配列を決定して同上委員会に提出したので,近日中にHPVとしての型番号を受けることとなった.
子宮頚がん例の病変部のHPV DNAの有無、型、臨床及び病理像と血清中抗体との関連を検討した。17例のHPV16 DNA陽性がん患者の中、抗E4抗体が6例、抗E7抗体が5例,検出され、1例では両抗体共陽性であった.HPV16 DNA陽性で抗体も陽性の患者では、リンパ節転移や遠隔転移が,抗体陰性の患者に比べ高頻度に認められ、これらの抗体の有無ががんの転移の指標となる可能性を示した。
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