| Project/Area Number |
04152063
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Cancer Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
江島 洋介 京都大学, 放射線生物研究センター, 助手 (50127057)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 正夫 京都大学, 放射線生物研究センター, 教授 (20013857)
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| Project Period (FY) |
1992
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1992)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1992: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | アタキシア・テランジェクタシア / 高発がん性遺伝病 / ヒト劣性遺伝病 / 放射線ハイブリド |
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| Research Abstract |
リンパ網内系の悪性腫瘍の好発を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)の原因遺伝子の単離を目的とし、AT遺伝子座近傍の染色体領域の解析とこの領域からのDNAの分離とクローン化を試み、以下の成果が得られた
1.AT患者由来の永代細胞株AT2KYSVを受容細胞とした染色体移入実験から、AT遺伝子座位を11q23領域に同定した。染色体移入実験の過程で、AT座位を消失すると同時に11q23領域に微小欠失をもつヒト細胞クローン2859/4-1を得、2859/4-1からマウスA9細胞への微小核融合を行ない、欠失X/11を転座染色体を単一に保有する1クローンA9(2859/4/1/2)-1を得た。
2.AT遺伝子座位近傍に転座点をもつヒトX/11転座染色体を有するヒト/マウス雑種細胞クローンA9(3552)-2に高線量のX線(30Gy〜120Gy)照射をして染色体を断片化した後マウス細胞に移入し、AT遺伝子座位近傍の微小な染色体断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。
3.マウス細胞内でのヒト染色体のDNAを調べるためAlu-PCRによる解析を行なった。AluプライマーTC65と517を用い、第11番染色体、X染色体、X/11転座染色体を保有するA9細胞、今回作成したA9(2859/4/1/2)-1、放射線ハイブリド、および親株A9細胞のDNA間で比較した。DNA増幅はヒト染色体に特異的で、各染色体に特有のPCR産物が認められた。PCR産物相互のサザン解析からA9(2859/4/1/2)-1で消失し、特定の放射線ハイブリドに含まれるPCR産物がいくつか確認された。これらDNAマーカーを手がかりにAT遺伝子座位傍をさらに詳細に解析中である。
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