デスモソームカドヘリン群cDNAを用いた天疱瘡抗原の解析

• Project/Area Number: 04454289
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Dermatology
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 橋本 隆 慶應義塾大学, 医学部・皮膚科, 講師 (20129597)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 工藤 純 慶応義塾大学, 医学部・分子生物, 助手 (80178003) ; 清水 信義 慶応義塾大学, 医学部・分子生物, 教授 (50162706) ; 海老原 全 慶応義塾大学, 医学部・皮膚科, 助手 (90203653) ; 西川 武二 慶応義塾大学, 医学部・皮膚科, 教授 (50051579)
• Project Period (FY): 1992 – 1993
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1993)
• Budget Amount: ¥6,800,000 (Direct Cost: ¥6,800,000); Fiscal Year 1993: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000); Fiscal Year 1992: ¥5,100,000 (Direct Cost: ¥5,100,000)
• Keywords: 天疱瘡 / デスモソーム / カドヘリン / デスモグレイン / 分子生物学 / cDNA / 複合蛋白 / ウエスタンブロット / 自己抗原 / 遺伝子工学 / デスモコリン / 尋常性天疱瘡抗原 / 細胞接着

Research Abstract

現在、デスモソームカドヘリンとして落葉状天疱瘡(PF)抗原であるデスモグレイン(DG)、ドスモコリン(DC)および尋常性天疱瘡(PV)抗原が知られている。初年度、私共はDCおよびDGのcDNAを用いて作成した大腸菌リコンビナント蛋白による研究により、DCが新しい天疱瘡抗原となり得る可能性を示し、さらにPF血清が主としてDGの細胞外部位に反応するのに対して、PV血清はDGの細胞内部位に反応することを示した。第2年度はまず、種々の天疱瘡患者の診断ないし病態の解明にこれらの研究を応用し、一部の患者では上記三種の抗原に対する抗体が共存すること、さらに、PVからPFに移行する症例があることを明らかにした。また、一部の臨床的には天疱瘡の症状を示さない患者にDGの細胞質内部位に対する抗体が存在することを示し、この抗体は病原性がないものと考えた。これらの研究は天疱瘡の病変発症の機序の解明に重要なものと考えた。さらに、私共は現在知られている三種のDCのcDNAを用いて大腸菌リコンビナント蛋白を作成し、IgGおよびIgAの抗DC抗体は少なくとも二種以上の異なったDC分子に反応することを示した。さらに、より自然に近い形のPV抗原を得るため、PV抗原cDNAをBaculovirus発現ベクターに組み込み、昆虫有核細胞に発現させたリコンビナント蛋白を作成した。この蛋白には、ほとんどすべてのPV血清が反応したことより、自然に近い形状を有していると考えられた。さらに、現在PV血清中のIgGを新生マウスに投与することにより病変を形成させることができることが知られているが、このリコンビナント蛋白によって吸収した血清IgGでは病変形成が生じなかった。このことは将来この蛋白を用いたカラムによる血漿交換療法により効率的に患者血中抗体を取り除くという最新の治療法の可能性を示したものと言える。

Research Products

• [Publications] 橋本隆: "デスモソームと天疱瘡" 医学のあゆみ. 165. 190-194 (1993)
• [Publications] 橋本隆: "水疱性皮膚疾患と細胞接着分子" 医学のあゆみ. 169. 7910-7916 (1994)
• [Publications] Hashimoto T: "Cadherins and blistering skin diseases" Current Opinion in Dermatology. 1. 244-249 (1993)
• [Publications] Dmochowski M,Hashimoto T et al.: "Desmocollins I and II are recognized by certain sera from patients with various types of pemphigus" Journal of Investigative Dermatology. 100. 380-384 (1993)
• [Publications] Amagai M,Hashimoto T et al.: "Absorption of pathogenic autoantibodies by the extracellular doamin of pemphigus vulgaris antigen" Journal of Clinical Investigation. (in press).
• [Publications] Hashimoto T et al.: "A case of bullous pemphigoid with anti-desmoplakin autoantibodies." British Journal of Dermatolgoy. (in press).
• [Publications] 橋本隆: "今日の治療指針" 医学書院, (1994)
• [Publications] 橋本 隆: "デスモソームと天疱瘡" 医学のあゆみ. 165. 190-194 (1993)
• [Publications] 橋本 隆: "水疱性皮膚疾患と細胞接着分子" 医学のあゆみ. 169. 7910-7916 (1994)
• [Publications] Hashimoto T: "Cadherins and blistering skin diseases" Current Opinion in Dermatology. 1. 244-249 (1993)
• [Publications] Dmochlwski M,Hashimoto T et al.: "The analysis off IgG subclasses of anti-intercellular antibodies in pemphigus by an immunoblot technique" Arch DermatoI Res. 284. 309-311 (1992)
• [Publications] Dmochowski M,Hashimoto T et al.: "Desmocollins I and II are recognized by certain sera from patients with various types of pemphigus." Journal of Investigative Dermatology. 100. 380-384 (1993)
• [Publications] Amagai M,Hashimoto T,Shimizu N et al.: "Absorption of pathogenic autoantibodies by the extracellular domain of pemphigus vulgaris antigen produced by Baculovirus" Journal of Clinical Investigation. (in press).
• [Publications] 橋本 隆: "今日の治療指針" 医学書院, (1994)
• [Publications] Dmochowski M,Hashimoto T et al.: "Desmocollins I and II are recognized by certain sera from patients with various types of pemphigus," J,Invest Dermatol.
• [Publications] Dmochowski M,Hashimoto T et al.: "Concomitant occurrence of circulating IgA anti-intercellular and anti-basement membrane zone antibodies" J Dermatol.
• [Publications] 橋本 隆: "自己免疫性水疱症の抗原" 皮膚病診療. 15. 290-296 (1993)
• [Publications] 橋本 隆: "デスモソームと天疱瘡" 医学のあゆみ.