| Project/Area Number |
04671495
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| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
内分泌・代謝学
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
岡田 耕治 自治医科大学, 医学部, 助手 (90213941)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
斉藤 寿一 自治医科大学, 医学部, 教授 (10048994)
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| Project Period (FY) |
1992
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1992)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1992: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | 血管平滑筋細胞 / バゾプレシン / 細胞内Na^+濃度 / 細胞内Ca^<2+>濃度 / 細胞内pH / Ca^<2+> / カルモジュリン系 / Cキナーゼ系 / 蛍光色素法 |
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| Research Abstract |
本研究では、細胞内Na^+濃度([Na^+]i)、細胞内遊離Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)そして細胞内pH(pHi)を蛍光色素法で直接測定し、血管平滑筋細胞(VSMC)におけるバゾプレシン(AVP)による[Na^+]i増加作用に対する[Ca^<2+>]i動員、Ca^<2+>/カルモジュリン系そしてCキナーゼ系の関与を検討した。1.AVPの[Na^+]i増加作用に対する[Ca^<2+>]i動員の役割。AVPによる[Ca^<2+>]i動員を細胞内Ca^<2+>キレート剤(BAPTA、50μM)で抑制し、AVP添加時の[Na^+]iの変化を検討した。BAPTAの10分間前処置は、[Ca^<2+>]iと[Na^+]iの基礎値には影響しなかったが、AVP添加時の[Ca^<2+>]i動員と[Na^+]i増加作用を完全に抑制した。2.AVPの[Na^+]i増加作用に対するCa^<2+>/カルモジュリン系の役割。Ca^<2+>/カルモジュリン系阻害剤(W〓、50μM)を用いて、AVPの[Na^+]i増加作用とCa^<2+>/カルモジュリン系の関係を検討した。W〓の10分間前処置は、pHiと[Na^+]iの基礎値には変化を与えなかったが、AVPによるNa^+/H^+交換系賦活化によるpHiのアルカリ化と[Na^+]i増加作用を完全に阻止した。3.AVPの[Na^+]i増加作用に対するCキナーゼ系の役割。[Na^+]iとCキナーゼの関係は、Cキナーゼ賦活剤(PMA)を用いて検討した。PMAは、同細胞の[Na^+]iには影響を与えなかった。PMAで細胞を24時間前処置しCキナーゼを抑制した細胞においても、AVP添加による[Na^+]i増加作用は同様に認められた。以上により、血管平滑筋細胞におけるAVPの[Na^+]i増加作用は、AVPの[Ca^<2+>]i動員とCa^<2+>/カルモジュリン系の賦活化に依存し、Cキナーゼ系の賦活化にはあまり依存していないことが示唆された。
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