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DNA複製酵素遺伝子の発現制御を担う転写因子DREF

Research Project

Project/Area Number 05273223
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionAichi Cancer Center Research Institute

Principal Investigator

廣瀬 富美子  愛知県がんセンター, 生物学部, 研究員 (60208882)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山口 政光  愛知県がんセンター, 生物学部, 主任研究員 (00182460)
Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 1993: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
KeywordsDNA複製 / DNAポリメラーゼalpha / PCNA / 転写因子 / DRE / DREF
Research Abstract

ショウジョウバエのDNA複製酵素であるPCNAおよびDNAポリメラーゼalpha遺伝子のプロモーター上流に共通の制御配列DREを見い出した。DREに特異的に結合する86kDaのポリペプチドの2量体よりなる転写因子DREFを見い出した。DREFを精製し、部分アミノ酸配列に基づいてcDNAと遺伝子を単離した。DREFのcDNAは731アミノ酸残基よりなる83kDaのタンパク質を支配する。DREFのN端1/3は塩基性アミノ酸に富み、中央1/3は酸性アミノ酸を多く含む。また、両者の間にはプロリンに富む短い領域が存在する。大腸菌で産出したDREFを用いて、塩基性アミノ酸に富む領域(46-270aa)がDREへの結合ドメインを含むことを証明した。発生過程におけるmRNA量の変化が複製遺伝子のそれとほぼ一致することを見い出し、DREF遺伝子発現量の変化がDNA複製遺伝子の基本的な発現にとって重要性を持つことを示唆した。組み替え体DREFを抗原にもちいて、各々異なるエピトープを認識する4つのモノクローナル抗体とウサギ抗DREF血清を得た。また、DREF遺伝子の遺伝的および生理的調節機構を解明するために,DREF遺伝子の転写制御配列の解析を進めている。なお、DREF遺伝子の染色体座位は30F〜31Aである。一方、PCNA遺伝子のプロモーターとその上流域を含む配列をlacZ遺伝子と連結し,多数の遺伝子導入ハエを作成し、発生段階特異的な発現にとって必要な制御配列を明らかにしつつある。卵巣における発現に必須であるのは転写開始点より上流86bp以内の基本プロモーターであり,DREはそれを増強する。初期胚での転写には,DREが必須となり,さらに幼虫期での発現には,DREおよびそのさらに上流50bpまでにある第2の調節配列が必要であることがわかった。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

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All Publications (6 results)

  • [Publications] Hirose F.: "Repression of regulatory for Drosophila DNA replication-related gene promoters by zerknullt homeodomain Protein" J.Biol.Chem.269. 2937-2942 (1994)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Matsukage A.: "Trans〓〓ptional regulation of DNA replication genes in cell grauth,differehtiation and oncogenesis" Jpn.J.Cancer Res.85. 1-8 (1994)

    • Related Report
      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Hirose F.: "Novel 8-bp soquence(DRE)and specific binding factor(DREF)involved in the expression of Drosaphila genes for DNA polymerasealpha and proliferaling cell nuclear antigen" J.Biol.Chem.268. 2092-2099 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Yamaguchi M.: "Activation of the mouse DNA polymerase beta promoter by odenovirus type 12 EIA proteins" Nucleic Acids Res.20. 2321-2325 (1992)

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  • [Publications] Hirose F.: "Structure and expression during development of Drosophila melanogaster gene for DNA polymerasealpha" Nucleic Acids Res.19. 4991-4998 (1991)

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  • [Publications] Yamaguchi M.: "Repression of Drosophila proliferating cell nuclear antigen gene promotor by zerknullt protein" Mol.Cell.Biol.11. 4909-4917 (1991)

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      1993 Annual Research Report

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Published: 1993-04-01   Modified: 2016-04-21  

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