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血管内皮細胞におけるNO合成酵素の調節機構

Research Project

Project/Area Number 05670615
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Circulatory organs internal medicine
Research InstitutionKobe University

Principal Investigator

川嶋 成乃亮  神戸大学, 医学部, 助手 (10177678)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 三輪 陽一  神戸大学, 医学部・附属病院, 医員
松田 祐一  神戸大学, 医学部・附属病院, 医員
横山 光宏  神戸大学, 医学部, 教授 (40135794)
Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1993: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywords酸化低比重リポ蛋白質 / 血管内皮細胞 / NO合成酵素 / 内皮由来血管弛緩因子 / 低比重リポ蛋白質 / リゾホスファチジルコリン / 遺伝性高脂血症家兎 / インターフェロン
Research Abstract

血管内皮細胞における一酸化窒素合成酵素(ecNOS)の調節機構を検討する目的で以下の検討を行なった。
1.ecNOS活性に及ぼす各種脂質の影響:
ウシ大動脈内皮細胞よりpollockらの方法を用いてecNOSを抽出し、その活性を^3H-arginineから^3H-citrulineへの変換を用いて測定した。各種の脂質が活性に及ぼす影響を検討すると、リゾフォスファチジルコリン(LPC)、フォスファチジルコリンなどのリン脂質はCa^<2+>ならびにcalmodulin存在下にecNOS活性を増加させるが、アラキドン酸は減少させることが判明した。
2.ecNOS mRNA発現に及ぼす各種サイトカイン、脂質の影響:ウシ大動脈内皮細胞よりecNOS cDNAよりRNAプローブを作成しRNAse protection assayを行なった。IFN α β、IFNγはecNOS mRNAを増加させたのに対し、TNFαは減少させた。また酸化LDLならびにLPCはmRNAを増加させた。nativeLDL、HDLは影響を与えなかった。
3.動脈硬化血管におけるecNOS mRNAの発現:in situ hybridization法を用いた検討により遺伝性高脂血症家兎大動脈内皮におけるecNOS mRNAの発現は正常家兎血管内皮に比べ増加していることが判明した。
以上の検討により血管内皮細胞ecNOS活性は各種脂質により調節されており、またそのmRNA発現はサイトカイン、LPC、酸化LDLにより影響を受けることが判明した。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Y.Ohashi: "Activation of nitric oxide synthase from cultured aortic endothelial cells by phospholipids" Biochem Biophys Res Comm. 195. 1314-1320 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] M.Koide: "Cyclic AMP-elevating agents induce an inducible type of nitric oxide synthase in cultured vascular smooth muscle cells" J Biol Chem. 268. 24959-24966 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Matsuda: "High density lipoprotein reveses inhibitory effect of oxidized low density lipoprotein on endothelium-dependent arterial relaxation." Circ Res. 72. 1103-1109 (1993)

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  • [Publications] M.Koide: "Expression of nitric oxide synthase by cytokines in vascular smooth muscle cells" Hypertension. 23. 45-48 (1994)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] S.Kawashima: "Regulatory mechanisms of endothelial nitric oxide synthase activity and its modification by lipids and cytokines" Jpn Circ J. 57. 1193-1197 (1994)

    • Related Report
      1993 Annual Research Report

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Published: 1993-03-31   Modified: 2016-04-21  

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