| Project/Area Number |
05680610
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| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Cell biology
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
平芳 一法 京都大学, 胸部疾患研究所, 助手 (80199108)
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| Project Period (FY) |
1993
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1993)
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| Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 1993: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Keywords | ストレス蛋白質 / コラーゲン / transtection |
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| Research Abstract |
HSP47は、コラーゲンの発現量に相関した発現を示す。発現調節を考えるうえで大きな興味となるのは、コラーゲンそのものがHSP47を誘導するためのシグナルそのものになり得るか否かである。このことを示唆するデータとしてV型コラーゲンを微量産生しているCHL細胞(Chinese hamster lung cell)にI型コラーゲンのal(I)鎖のみをstableにtransfectした細胞と、α1(I)およびα2(I)をstableにtransfectした細胞を用いて、HSP47の発現量を比較した。HSP47の発現は、コラーゲンの発現量が増加するにしたがって増加し、細胞外に分泌されにくいα1(I)のホモトライマーをさんせいしている細胞でより多くの増加が観察された。この事実は、コラーゲンそのものがHSP47を誘導するシグナルそのものであることを示唆するものである。さらにこの事実を検証するため、種々の変異を導入したコラーゲン遺伝子をtransientに発現する系を確立した。
同時にHSP47の転写調節領域におけるコラーゲン反応部位を検索するため、定法どおり欠損変異による突然変異体を作成し、レポーター遺伝子につなぎ細胞に導入した。細胞によっては、正常な状態でのCAT活性の回収が非常に悪く、transientによる解析が困難であった。導入する細胞として上述のCHL細胞を用いることにより、非ストレス下でもCAT活性を回収することが可能となった。現在、コラーゲンとHSP47プロモーター遺伝子のco-transfectionによりコラーゲンの変動に伴うHSP47の発現調節部位の同定を試みている。
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