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新しい免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜タンパク質の機能解析

Research Project

Project/Area Number 05680629
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Cell biology
Research InstitutionTokyo Metropolitan Organization for Medical Research

Principal Investigator

小池 智  財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 微生物研究部門, 研究員 (30195630)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 青木 淳賢  微生物, 研究員 (20250219)
Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1993: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Keywordsポリオウイルスレセプター / PVR / 免疫グロブリンスーパーファミリー / 細胞接着 / モノクローン抗体
Research Abstract

新しい免疫グロブリンスーパーファミリーに属するポリオウイルスレセプター(PVR)の生理的な機能を明らかにするために今年度は特にPVRのマウスホモログ(mPVR)に焦点を絞り、1)mPVRリコンビナントタンパク質の大量発現、2)抗mPVRモノクローン抗体の作製、3)mPVR強制発現細胞株の樹立を行いこれら材料を用い、4)mPVRが細胞間の接着に関与しているか検討した。
1)mPVRとイムノグロブリンFc領域との融合タンパク質(mPVR-Ig)をバキュロウイルスの系を用い大量発現し、Protein A、FPLCで精製した。蚕300匹より約100mgのリコンビナントタンパク質が精製できた。
2)精製したmPVR-Igをラットあるいはハムスターに免疫し常法に従いモノクローン抗体を作製した。IgGクラスのモノクローン抗体を約20クローン確立した。
3)得られた抗mPVRモノクローン抗体を用い各種培養細胞株におけるmPVRの発現を調べたがその発現量は少なかった。そこでmPVRの機能を調べる目的でmPVRを大量に発現しているステーブルトランスフォーマントを作製した。マウスL細胞、HeLa細胞に膜貫通型のmPVRを発現させたクローンを選択した。
4)得られたmPVRステーブルトランスフォーマントはコントロールの親株に比べ顕著に細胞凝集活性が上昇しており、この細胞凝集は抗mPVRモノクローン抗体で阻害された。また、これら細胞上でmPVRは細胞間の接触部位にのみに局在しており、これらの事実よりmPVRが細胞間の接着タンパク質であることが示された。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Hitoshi Horie et al.: "Transgenic mice carrying the human poliovirus receptor:new animal model for study of poloivirus neurovirulence." J.Virol.68. 681-688 (1994)

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  • [Publications] Junken Aoki et al.: "Amino acid residues on human poliovirus receptor involved in interaction with poliovirus." J.Biol.Chem.in press.

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  • [Publications] Akio Nomoto et al.: "Tissue tropism and species specificity of poliovirus infection." Trends in Microbiology. 2. 47-51 (1994)

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  • [Publications] 小池 智: "ポリオウイルスレセプターの分子生物学的研究" ウイルス. 43. 245-257 (1993)

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  • [Publications] 青木淳賢 他: "Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM)と接触阻害" 生体の科学. 44. 299-305 (1993)

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      1993 Annual Research Report

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Published: 1993-04-01   Modified: 2016-04-21  

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