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浸透圧耐性根粒菌の育種とその根粒形成に関する研究

Research Project

Project/Area Number 05760056
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 応用微生物学・応用生物化学
Research InstitutionObihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Principal Investigator

大和田 琢二  帯広畜産大学, 畜産学部, 助手 (90211804)

Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1993: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywords浸透圧調節 / 根粒菌 / 浸透圧ストレス
Research Abstract

1.大腸菌(pSUP5011を保有したS17-1株)をトランスポゾン(Tn5)の供与菌とし、ダイズ根粒菌(Rhizobium Fredii USDA 191株)とのメ-ティングによって浸透圧感受性変異株を得た。特異株には、対数期でNaClを添加した時にのみ増殖が抑制される株と、予めNaClを含んだ培地に移した時にのみ増殖が抑制される株の2つのタイプが得られた。
2.1で得られた変異株は、宿主植物(WilliamsとBragg)に根粒を形成したが、その重量は親株の約半分であり、白色を呈していたことから、窒素固定能力の無い無効根粒であると考えられた。また、自然界の宿主植物(インゲン)から新たに単離した38株の根粒菌について、その根粒重量と浸透圧調節機能とを比較したところ、両者の間には危険率1%で有為な相関が見られた。これらの結果から、浸透圧調節機能は有効な根粒を形成する上で、重要な役割を担っていると考えられた。
3.根粒菌の細胞内ATPレベルは、培地に高い浸透圧を加えた場合、一般にコントロールに比して高く維持される傾向にあったが、変異株のATPレベルはコントロールとほぼ同じレベルであった。イオン、アミノ酸類の細胞内含量には、親株と変異株との間に有為な差異は認められなかった。
4.Tn5のHind III領域をプローブとして、変異株の全DNAとサザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、Tn5の挿入箇所は1箇所であり、クロモゾーム上であることがわかった。現在、浸透圧調節に関わると考えられる15kbのEcoR I断片をクローニング中である。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report

URL: 

Published: 1993-04-01   Modified: 2016-04-21  

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