ナトリウム・ミオイノシトール共輸送体の分子生物学的・電気生理学的研究

• Project/Area Number: 05770038
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General physiology
• Research Institution: Okazaki National Research Institutes
• Principal Investigator: 挾間 章博 岡崎国立共同研究機構, 生理学研究所・細胞器管研究系・機能協関部門, 助手 (60218394)
• Project Period (FY): 1993
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1993)
• Budget Amount: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000); Fiscal Year 1993: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: ナトリウム・ミオイノシトール共輸送体 / ミオイノシトール / アフリカツメガエル

Research Abstract

ナトリウム・ミオイノシトール共輸送体のcRNAをアフリカツメガエル卵母細胞に注入し、2本微小電極による膜電位固定法を行った。細胞外Na存在下でミオイノシトール(MI)を与えると濃度依存性に内向電流(膜電位0mV--150mV)が観察された。K_<0.5>^<MI>は約50muMであり、電位依存性は認められなかった。また、この電流は細胞外Na非存在下では内向電流は消失し、Na電流であることが明らかになった。K_<0.5>^<Na>には電位依存性があり、76mM(-50mV)から40mM(-150mV)という値であった。またヒル係数は1.9であり電位非依存性であった。このことから1個のMIにたいして2個のNaが運ばれるものと考えられた。またこの電流は、ナトリウム・グルコース共輸送体の阻害剤であるphlorizinにより抑制を受けた。さらに基質特異性を調べるために、種々の糖質を50mM投与し、-150mVで得られる電流を比較した。その結果、MI>L-fucose>L-xylose>L-glucose,D-glucose,a-methyl-D-glucose>D-galactose,D-fucose,3-0-methyl-D-glucose,2-deoxy-D-glucose>D-xyloseという順序が得られた。また、細胞外Na存在下で、voltage stepを与えると、一過性電流がえられ、この一過性電流はphlorizinにより消失した。この一過性電流については既にナトリウム・グルコース共輸送体で報告されたゲート様電流と同じ性質のものであると予想された。以上のように卵母細胞発現系において、ナトリウム・ミオイノシトール共輸送体の電気生理学的性質を詳細に調べることに成功し、この結果は平成6年3月の生理学会にて発表される予定である。