| Project/Area Number |
05770614
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Dermatology
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
森田 栄伸 広島大学, 医学部, 助手 (90182237)
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| Project Period (FY) |
1993
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1993)
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| Budget Amount *help |
¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1993: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
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| Keywords | ケラチノサイト / stem cell factor / 色素細胞 / PCR / c-kit / 表皮 |
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| Research Abstract |
骨髄幹細胞、肥満細胞および色素細胞の分化、増殖にはc-kit受容体が重要な役割をしている。近年、c-kit受容体と結合するリガンド(stem cell factor/mast cell growth factor)が同定され、骨髄ストローマ細胞や真皮線維芽細胞に発現されていることが明らかになった。われわれは培養ケラチノサイトがstem cell factorのmRNAを発現していることをPCR法でみいだしている。色素細胞は表皮基底層でケラチノサイトに囲まれて存在していることから、色素細胞の分化、増殖にはケラチノサイトが発現しているstem cell factorが重要な役割をしているものと推定される。さらに、PCR法で増幅されたcDNAをサブクローニングしその塩基配列を決定し、ケラチノサイトが発現しているstem cell factorのmRNAは全長型であることを明らかにした。さらに、ケラチノサイトがstem cell factorの蛋白を表現していることを明らかにするために、当教室で樹立したケラチノサイトの培養細胞株KCMH-1の蛋白を可溶化し、stem cell factorに対するポリクローナル抗体を用いてウエスタンブロット法で検出したところ、32KDおよび20KDの蛋白が検出された。全長型のmRNAから翻訳されるstem cell factorは通常膜結合型であるが、一部は蛋白分解酵素により切断されて遊離型となることが知られている。今回検出された32KDおよび20KDの蛋白はそれぞれ膜結合型および遊離型に相当するものと思われる。また、吸引水疱により皮膚局所から表皮細片を採取し、PCR法でstem cell factorのmRNAの発現を検討したところ、健常人皮膚でmRNAが検出され、stem cell factorは表皮で恒常的に発現されていることが推察された。色素異常がみられる皮膚疾患でstem cell factorの発現異常があるかどううか現在検討中である。
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