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婦人科悪性腫瘍における抗癌剤耐性とDNAトポイソメラーゼ遺伝子の発現に関する研究

Research Project

Project/Area Number 05771233
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Obstetrics and gynecology
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

横田 治重  東京大学, 医学部, 助手 (40182696)

Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1993: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
KeywordsII型トポイソメラーゼ / エトポシド耐性
Research Abstract

(1)子宮頚癌由来の細胞株 SiHa,CaSki,HeLaの3株の培養液中に、II型トポイソメラーゼ阻害剤であるエトポシドを加え、耐性株を作成した。エトポシドは0.01mug/mlより順次濃度を上げて添加し、SiHa株においては、0.4mug/ml(親株に比し4〜5倍耐性)、CaSki株においては1.0mug/ml(親株に比し10倍耐性)の濃度においても充分発育する耐性株を得た。得られた耐性株は、いずれも親株に比し長い倍加時間を有した。
(2)RT-PCR法を応用したトポイソメラーゼのisozyme,IIalpha,IIbetaの発現量の検討を親株とエトポシド耐性株について行なった。トポイソメラーゼIIalpha,IIbetaのmRNAで、5´末端,3´末端とも20bpの全く共通の配列を有する、約300bpの領域を同時増幅した。増幅したDNA断片は、IIbeta由来産物のみを切断する制限酵素Bsp1286Iで切断し、アガロースゲル上で電気泳動して、ethidium bromide 染色でのIIalpha、IIbeta各々に由来するDNA断片のbandの濃度から発現量を検討した。親株においては、IIalphaがIIbetaに比べ明らかに多量の発現を示すのに対して、耐性株ではIIalphaとIIbetaの発現量はほぼ同等であり、isozymeの構成に差がみられた。

Report

(1 results)
  • 1994 Annual Research Report

URL: 

Published: 1993-04-01   Modified: 2018-06-07  

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