顆粒膜細胞の増殖、分化に及ぼすエストロゲンのオートクリン作用に関する研究

Research Project

Project/Area Number	05771234
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Obstetrics and gynecology
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	梁喜光 (1994) 東京大学, 医学部, 助手 (20220808) 梁善光 (1993) 東京大学, 医学, 助手
Project Period (FY)	1993
Project Status	Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help	¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000) Fiscal Year 1993: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywords	顆粒膜細胞 / オートクリン / パラクリン作用 / エストロゲン / 上皮増殖因子(EGF)
Research Abstract	[目的]顆粒膜細胞に由来するestrogenは卵に対して成熟促進作用が知られているが、顆粒膜細胞自体に対しても我々が既に報告したようにepidermal growth factor(EGF)receptorの調節などautocrine的機序での生理作用が注目されている。そこで今回estrogenがラット顆粒膜細胞の増殖に及ぼす影響をEGFとの関連において検討した。[方法]Wistar系幼若雌ラットにPMSG101Uを皮下注し、48h後に顆粒膜細胞を採取してphenol red(P)(-)Medium199中に単層培養した。24hの前培養後、実験計画に従い各種試薬を添加しさらに24〜36hの培養を継続した後に^3H-thymidine(1uCi/ml)を加えてその後の24時間に取り込まれた^3H-thymidineの酸不溶性分画量を測定しDNA合成量とした。なおPにはestrogen作用があることが知られており前培養以降はP(-)と(+)の双方の条件下で実験を行った。[成績](1)estradiol(E_2)はP(-)培養液中では単独で10^<-11>〜10^<-6>の濃度範囲で用量依存性にDNA合成を促進し、10^<-8>Mで対照の約1.7倍になった。(2)P(+)ではP(-)の約1.5倍にDNA合成量を促進した。(3)E_210^<-8>MはP(+)培地内ではP(+)対照に対し増殖効果を発現しなかった。(4)P(-)培養液中でEGFはDNA合成促進効果を認めなかった。しかし、前培養後E_210^<-8>M存在下でさらに12h培養してEGFを添加するとP(-)E_2(-)でもEGFはDNA合成量を対照の約200%に増量させた。(5)P(+)ではEGFは用量反応的にDNA合成量を増量したが、E_2添加によっても増加率は不変であった。[結論]estrogenはラット顆粒膜細胞の増殖に対し促進的に作用する。また単独ではDNA合成に影響を与えないEGFに対してもestrogenはpermissiveに作用する。これは前述の我々の報告を併せるとestrogenよるEGF受容体数増加に基づいている可能性が示唆された。