マウスOct-3蛋白質のPOUドメインの立体構造とサブドメイン構造の解析

Research Project

Project/Area Number	05780480
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Biophysics
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	白川昌宏大阪大学, 蛋白質研究所, 助手 (00202119)
Project Period (FY)	1993
Project Status	Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help	¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000) Fiscal Year 1993: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Research Abstract	大腸菌に産製させた67残基からなるマウスOct-3 POU-homeoドメインのほぼ全ての^1H,^<15>N,^<13>C核のシグナルの帰属を完了した。帰属には主として、^1H/^<15>N/^<13>C核3重共鳴3次元性を用いて行った。得られた帰属を基に、主に3次元^1H/^<15>N NOESY-HSQC、^1H/^<13>C NOESY-HSQCから距離情報を、2次元HMQC-Jなどから角度情報を収集した。収集した角度情報、距離情報を使って、X-plorによりsimulated annealing distance geometry計算を行い、マウスOct-3 POU-homeoドメインの溶液中での立体構造を決定した。その結果、この蛋白質は3本のalphaヘリックスを持ち、2番目のヘリックスと3番目のヘリックスとそれらを結ぶ領域で、ヘリックス-ターン-ヘリックス(HTH)DNA結合モチーフを持つ事が判った。その中でも特に、ドメイン全体の構造、特に3本のヘリックスの折り畳まれ方は、ショウジョウバエのAnntenapedia,Engrailedなどのホメオドメインと非常に良く似ていた。しかし、ホメオドメインの特徴である、HTHモチーフのC末端側の長いヘリックスは、POU-homeoでは見られなかった。これは、POU-homeoドメイン単独では、十分強いDNA結合活性を持たない事の説明になるとも考え得る。