高次筋収縮系における構造的・機能的再構築と力学特性の研究

• Project/Area Number: 06213233
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: Waseda University
• Principal Investigator: 石渡 信一 早稲田大学, 理工学部, 教授 (10130866)
• Project Period (FY): 1994
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1994)
• Budget Amount: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000); Fiscal Year 1994: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
• Keywords: 筋収縮運動系 / 筋原線維 / アクチンフィラメント / 心筋線維 / 細いフィラメントの再構築 / 顕微画像解析 / 分子モーター / in vitro滑り運動系

Research Abstract

本研究の目標は、バイオメカニクス研究の一環として筋収縮運動系を取り上げ、その構造と機能を、力学特性の面から明らかにすることにある。我々は特に、横紋筋線維(骨格筋と心筋)り収縮要素系(この主要な構成要素は、アクチン、ミオシン)と弾性要素系(コネクチン(タイチン)、ネブリンなど)を取り上げた。さらに、レーザー光ピンセット法を用いて筋収縮系を構成する単一分子モーター(アクチン、ミオシン分子複合体)の力学特性を検討した。(1)顕微鏡下における単一筋原線維の力学特性の研究においては、画像検出系に4分割フォトダイオ-を装備して時間分解能を向上させることができた。その結果、等尺性のみならず等張性条件下での研究が可能になった。この装置は、自励振動条件下での単一筋原線維の長さ振動の研究に応用された。(2)筋(原)線維内での細いフィラメントの構造的・機能的再構築の研究においては、昨年度からの研究を更に推進し、ウシ心筋線維束中でアクチンフィラメントが100%以上再構成されることを、超薄切片電子顕微鏡観察によって確認した。再構成されたアクチンフィラメントの本数は、元の細いフィラメントの本数とほぼ同じだったが、長さが平均で数十%長くなっていた。しかしこれだけでは、再構成筋線維において発生張力が200%以上にも達するという実験結果を説明できない。そこで、心筋線維中では発生張力が100%発揮できないような調節(因子)機構が働いているのではないかと推測された。(3)in votro滑り運動系においては、硬直条件(ATP非存在)下にあるHMM(ミオシン分子の酵素断片)一分子とアクチンフィラメントの間の結合力(実際は破断力)をレーザー光ピンセット法によって顕微計測し、平均9.2pNという値を得た。さらに、この実験系の張力-歪みの曲線からHMM一分子の弾性率を約0.6pN/nmと見積もった。この値は、筋線維を用いて得られたミオシン頭部の曲げの平均弾性率(約10億個のミオシン分子の平均)とほぼ同じ大きさであった(しかし我々の見積もった弾性率にはHMM分子以外の弾性要素の寄与が含まれている可能性があり、今後の検討課題である)。