HTLV-1のTax蛋白質による転写因子活性化の分子機構

Research Project

Project/Area Number	06266222
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
Principal Investigator	藤田尚志財団法人東京都臨床医学総合研究所, 腫瘍細胞研究部門, 研究員 (10156870)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平井玲子財団法人東京都臨床医学総合研究所, 腫瘍細胞研究部門, 研究員 (00125238) 米山光俊財団法人東京都臨床医学総合研究所, 腫瘍細胞研究部門, 研究員 (40260335)
Project Period (FY)	1994
Project Status	Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help	¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000) Fiscal Year 1994: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Keywords	転写因子 / コアクティベータ- / 白血病 / 癌遺伝子
Research Abstract	HTLV-1Tax蛋白質の生化学的な解析をめざし、Tax蛋白質の大量精製を試みたが成功しなかった。そどえHTLV-1Tax蛋白質同様コアクティベータ-として転写制御に関与していると考えられているbcl-3遺伝子産物について解析を行った。bcl-3遺伝子産物はDNA結合性のNF-kBファミリー蛋白質p50あるいはp52のホモダイマーと特異的に結合することにより作用していると考えられている。しかしながらbcl-3遺伝子産物がp50のDNA結合を阻害するか否かについては議論がある。これらの点を含めてさらに詳しく解析する目的で生化学的な検討を行った。組換え体p50およびbcl-3遺伝子産物をバキュロウイルスの系を用いて大量生産、精製を行い、これらのDNA結合特異性を検討した。ランダムな塩基配列を一部に有するDNAを合成し、p50単独、あるいはbcl-3遺伝子産物との共存下で結合する配列を選択的に回収した。PCR法によってこのDNA配列の増幅、選択を繰り返し、得られた配列を検討した。その結果p50単独を用いた場合はいわゆるNF-kBのコンセンサス配列に近いものが回収されることがわかった。ところがbcl-3遺伝子産物の共存下ではコンセンサスとは異なる配列を有するものがほとんどであった。このことはp50のDNA結合特異性がbcl-3遺伝子産物との相互作用によって大きく変化することを示している。すなわちプロモーター上のNF-kBのコンセンサス配列だけではなく、今まで知られていなかったシスエレメントを介して遺伝子発現の制御を行っている可能性が強く示唆された。