膜細胞骨格蛋白質異常に基づく心筋細胞機能失調の研究

Research Project

Project/Area Number	06274235
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	National Cardiovascular Center Research Institute
Principal Investigator	重川宗一国立循環器病センター研究所, 循環分子生理部, 部長 (00113738)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	池田俊太郎国立循環器病センター研究所, 循環分子生理部, レジデント岩田裕子国立循環器病センター研究所, 循環分子生理部, 室員 (80171908) 木島祥行国立循環器病センター研究所, 循環分子生理部, 室員 (30260350)
Project Period (FY)	1994
Project Status	Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help	¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000) Fiscal Year 1994: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywords	心筋症 / 心筋症ハムスター / ジストロフィン / ジストロフィン結合糖蛋白質 / 細胞骨格
Research Abstract	本研究においては、心筋機能不全の発症メカニスムを研究するモデルとして、遺伝性心筋症ハムスター心筋異常について検討を行っている。昨年度までの研究で我々は、心筋症ハムスター心筋の場合、細胞骨格系に異常があり50kDaジストロフィン結合糖蛋白質(DAG)が細胞膜から欠損していること、ジストロフィンと他のDAGとの結合性が失われていることを示した。今年度は、50kDDAGについてさらに調べ、この動物心筋には、ほぼノーマルサイズのmRNAが正常心筋とほぼ同量発現していることがわかった。現在そのcDNAの塩基配列を正常のものと比較検討している。また、正常ハムスター心筋からのジストロフィン-DAG複合体の分離精製を行い骨格筋のものと比較した。心筋のジストロフィン-DAG複合体は、骨格筋とは異なって、ミクロゾーム分画からは抽出できないが、デタ-ジェント存在下心筋を直接ホモジネートすることにより50-60%の効率で可溶化できることが明かになった。精製は、さらにレクチンaffinity chromatography及びジストロフィン抗体chromatographyにより行った。その結果、複合体を構成するDAPの組成には心筋と骨格筋とで大きな差異を認めなかったが、心筋では、複合体含量が骨格筋より約10倍多いことが判明した。