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¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 1994: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
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| Research Abstract |
我々は,基質遷移状態に着目してそのミミックをデザインするという新しく論理的な方法を用いて,アスパラギン酸プロテアーゼ阻害剤のデザインを行なってきており,高血圧治療薬としてレニン阻害剤,抗エイズ薬としてHIVプロテアーゼ阻害剤などのデザインを行ない,強力な阻害剤の合成に成功した.この有用な方法を,HTLV-1プロテアーゼ阻害剤のデザインに応用し,基質遷移状態誘導体と酵素の相互作用の解析から阻害剤を分子設計し,それに基づいて,ペプチドmimicを合成しメカニズムの明確な抗ATL薬の開発をめざした.また,本研究に必要なHTLV-1プロテアーゼおよび化学的に安定な誘導体を,効率的固相法を用いて化学合成した.
1.HTLV-1プロテアーゼ及び誘導体は我々が開発した希釈メタンスルホン酸をα-アミノ保護基切断に使用する効率的固相合成法で合成した.また,HTLV-1プロテアーゼ中のは2つのシステインをイソステリックなアミノ酸に変換した誘導体を合成した.
2.基質ペプチドとして,p19/p24(Pro-Gln-Val-Leu-Pro-Val-Met-His),p24/p15(Thr-Lys-Val-Leu-Val-Val-Gln-Pro)を合成した.
3.阻害剤.遷移状態誘導体の概念に基づいてHTLV-1プロテアーゼに特徴的な基質の切断部位Leu-ProおよびLeu-Val(P1-P1′)のアミド結合をイソステリックな還元型[CH_2-NH],ヒドロキシエチレン型[CHOH-CH_2],ジヒドロキシエチレン型[CHOH-CHOH]に変換し,各基質遷移状態誘導体を合成した.
4.阻害活性の測定.合成したHTLV-1プロテアーゼ及び合成基質を用いて酵素活性測定系を確立し,この系を用いて合成阻害剤の阻害活性の測定を行なった.
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